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核酸蛋白检测仪又紫外检测仪,是液相色谱实验中的一种紫外检测仪,和层析柱、恒流泵、自动部份收集器和液相色谱数据工作站等相互配备就使得一套完整的分离层析系统组成了。
其作为是生物化学、分子生物学、基因工程、制药、化工、农业、食品以及医院等有关科研部门和生产单位在分离分析工作中的工具不可或缺。
问题:读数不稳
样品浓度太低,A260mm的吸光值必须>0.1,读数才有意义。留心是否刚从冰箱将样品取出,样品在室温条件下升温,引起读数不稳。除此之外,很多人做空白试验时的空白液为水,应当在测试前保证水新鲜和纯净。如果有漂浮在水中,会造成读数漂移严重。
问题:核酸和蛋白可测定的Z小值
0.000-3.000为仪器的吸光值范围。DNA样品测试中,0.05为检测的Z低吸光值。然而,在实际的操作中,想要获得信赖,A260mm的吸光值>0.1才能够满足要求。比色法检测蛋白质,因为使用不同的试剂,因此准确的范围没有办法确定,蛋白质直接法检测,消光系数会对其浓度值产生影响。
公式为:浓度=吸光值×光系数+稀释倍数。
4mg/m1大约是蛋白质可以检测的Z大范围。
问题:仪器读数发生漂移
任何分光光度计均是对吸光值或者透光值进行测定。Biophotometer显示吸光值,然后浓度根据一定的公式换算而来。因此吸光值是反映仪器性能和数据是否准确的关键指标。如果仪器正常,那么同一样品的所有吸光值在均数的正负0.5%左右浮动,如果测试准确,那么读数在一个标准品的1%的误差范围内。
问题:读数几次读数相差很大或者出现值
需要在测试之前做空白测试。空白液和溶解和稀释样品的液体必须有相同的性质,测试之前必须充分混匀,并确保没有产生气泡。测试中留心比色杯有相同的方向,光径准确。
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