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紫外分析仪原理

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紫外分析仪采用不同波长的紫外光对DNA、RNA电泳凝胶样品进行观察拍照、检测蛋白质、核甘酸,也可以同时发出长波紫外线、短波紫外线和可见光三种波长的光辐射。紫外分析仪适用于核酸电泳、荧光的分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析,薄层分析,是开展RFLP研究,RAPD产物分析的理想仪器。紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。

紫外分析仪
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紫外分析仪的原理
紫外分析仪的原理|使用方法|用途

  紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析或薄层分析等。紫外分析仪器广泛应用于生物、化学、医药、制药、食品及法医鉴定部门的分析、检测。

紫外分析仪的原理

  普通处于基态的物质分子受到激发光(即紫外线)照射后,吸收了激发的能量,物质分子处于激发状态。激发态分子的能量一部分消耗于振动,于是分子处于振动能级,从振动能级回到基态时多余的能量依其它的形式放出来即为荧光,而不同物质能发出不同波长的荧光,人们可以根据不同光色的荧光和荧光的强弱来判断不同的物质和含量多少,这就是荧光分析。

  254nm短波紫外分析仪的荧光分析原理

  短波紫外分析仪应用波长254nm(短波)的单色光源。利用低压汞灯在波长254nm处有强大的能量发射。使用透紫外线滤片,将可见光滤去从而得到高能量紫外单色光,以供荧光分析。

  365nm长波紫外分析仪的荧光分析原理

  长波紫外分析仪应用低压水银蒸气放电,低压水银灯主要发射的是254nm短波,紫外线采用光量子转调法,在灯管内壁涂上一层特性荧光材料,使它吸收254nm短波紫外线而在365nm附边形成较宽的紫外光谱带,从而它具有低压汞灯功耗小,随关随开,随开随用的特点,经过滤色片滤去可见光,得到高能量长波紫外线。

紫外分析仪的使用方法

  根据需要,分别按下操作面板上的与点样灯、254nm和365nm紫外灯对应的控制开关,可分别打开或关闭某一灯,进行观察工作即可。

  1、用定量取样器裁取100cm2的标准圆形试样,将试样放置在工作台上。

  2、打开点样灯开关,开启底面透射灯光,便于观察。

  3、分别打开254nm或365nm波长的紫外灯进行观察。并用面积比对胶片进行比对,在任何一种波长照射下,若荧光部分面积超过产品相关标准中规定面积(一般为5cm2),则判定该产品不合格。在任何一种波长照射下,若荧光部分面积小于产品相关标准中规定

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紫外分析仪的分类
紫外分析仪的分类

  紫外分析仪分为很多种,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪适用于核酸电泳分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析或薄层分析等。

三用紫外分析仪

  三用紫外分析仪采用不同波长的紫外光对DNA、RNA电泳凝胶样品进行观察拍照、检测蛋白质、核甘酸、适用于核酸电泳、荧光的分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,是开展RFLP研究,RAPD产物分析的理想仪器。

  三用紫外分析仪无需在暗室操作,便可对电泳凝胶进行紫外观察和照相,也具有蛋白检测仪对蛋白进行观察和照相的功能。三用紫外分析仪的紫外强而均匀,可接反射灯等。

  三用紫外分析仪的使用方法:

  三用紫外分析仪设置三个开关键,分别控制点样灯,254nm和365nm紫外灯,且相互独立,当需要某一灯工作时,按下相应开关键即可。

  三用紫外分析仪的用途:

  1、在科学实验工作中检测,检测主要物质如蛋白质、核苷酸等。

  2、在药物生产和研究中,三用紫外分析仪可用来检查激素生物碱,维生素等各种能;产生荧光药品质量,特别适宜作薄层分析和纸层分析斑点和检测。

  3、在染料涂料橡胶、石油等化学行业中,三用紫外分析仪可测定各种荧光材料,荧光指示剂及添加剂,鉴别不同种类的原油和橡胶制品。

  4、纺织化学纤维中可测定不同种类的原材料。如羊毛,真丝人造纤维,棉花,合成纤维,并可检查成品质量。

  5、在粮油,蔬菜,食品部门,可用于检查毒素。食品添加剂,变质的蔬菜、水果、可可豆舫、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的质量。

  6、在地质、考古等部门,三用紫外分析仪可起到发现各种矿物质,判别文物化石的真伪。

  7、三用紫外分析仪可检查指痕,测定密写字迹等。

暗箱式紫外分析仪

  暗箱式紫外分析仪适用范围:

  暗箱式紫外分析仪是提供白光和紫外光照射的装置。主要用于蛋白质电泳观察、照相。带箱

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紫外分析仪的校准规范
紫外分析仪的校准规范

  紫外分析仪广泛应用于药物、染料涂料、蔬菜、食品等领域,紫外分析仪的校准就显得十分重要。紫外分析仪的校准内容包过紫外分析仪的波长、紫外灯辐照强度、灯稳定性计量性能等方面。

紫外分析仪的用途

  紫外分析仪一般采用石英玻璃紫外灯和滤色片组成,紫外灯发出的光经滤光片后滤去可见光,从而得到高能量窄谱紫外单色光。常用的光源波长分别为254nm和365nm,其中254nm紫外光照射到微生物后,会破坏细胞的核蛋白和DNA链,有效地杀灭各种细菌和病毒;365nm紫外光源在化工、纺织工业的分析、检测、YL和医药等领域都有重要应用。

  当某种常温物质经过紫外线光照射,吸收光能后进入激发态,光激发后,在极短时间内发射出波长大于激发波长的光称为荧光。紫外分析仪是利用荧光技术对各种荧光材料、食品添加剂、农药残留等进行定性分析。

紫外分析仪的校准

  紫外分析仪校准用设备

  ①紫外光谱辐射测量仪:工作波段为(200~400)nm,波长准确度≤±0.1nm。

  ②紫外辐射照度计:紫外辐射照度计应包括波长254nm和365nm的探头,Z小分度值≤1μW/cm2,MPE≤±10%。

  ③钢尺:Z小分度值≤1mm。

  ④紫外辐射防护镜和手套

  光谱辐射测量仪、紫外辐照计、直尺必须经计量部门校准或检定,并在校准或检定有效期内。

  紫外分析仪校准方法

  1、波长峰值及半峰高宽度测量

  如上图所示,打开紫外分析仪波长254nm光源预热15min,将光谱辐射计探头置于被校准仪器台面ZX处测量,重复测量3遍,按下式分别计算峰值波长λp和峰值半高宽度Δλ。同样方法测量紫外分析仪波长365nm光源的峰值波长λp和峰值半高宽度Δλ。

  式中,λpi为第i次测量的峰值波长(i=1、2、3;单位为nm);Δλi为第i次测量的峰值半高宽度(单位为nm)。

  2、辐射照度值测量

  将紫外辐射照度计探头置于紫外分析仪台面ZX,调整紫外分析

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