FluoSurf氟表面活性剂/液滴生成油/PCR油,疏水试剂ST2/液滴破乳剂,氟油7500: 细胞酶液滴包裹/分选/融合/培养
可靠 创新 同行 发展
基于液滴的微流体技术是一种新兴的强大工具,适用于dPCR或单细胞分析等生物应用。作为微反应器的液滴,可以在微流控芯片中产生,具有非常高的吞吐量,可在较短的时间内进行大量的平行实验。
氟化油通常用作这类应用的连续相,因为其能够溶解和输送氧气,并且不溶解大多数化学和生化化学物。
FluoSurf 是一种生物相容性氟化表面活性剂,专为生产单分散油包水液滴而设计和优化。FluoSurf 可确保液滴的长期稳定性(即使在极端条件下也是如此)。
优势
● 稳定性
即使在dPCR或长期细胞培养实验等具有挑战性的条件下,也能实现单分散液滴群体和低液滴融合。
● 生物相容性
经细胞检测验证的生物相容性,适用于生物实体。
● 批量生产
我们的大批量生产能力使我们能够满足您的所有需求
● 较高纯度
在制造加工过程中去除杂质
● 泄露控制:液滴内的分散相物质较少量的渗透到液滴外部
● 批次间重现性
每个批次都遵循严格的质量控制分析,通过验证结构和微流体性能来确保一致性。
FluoSurf 在高温处理(例如PCR的加热循环)后仍保证液滴稳定性和群体单分散性。
应用领域
● 数字液滴PCR
基于对液滴内大量分隔PCR反应的统计分析的超灵敏核酸定量方法
● 单细胞分析
在受控环境下处理和分析单分散液滴群体中的分离细胞
● 筛选
在微滴内以高通量对细胞、基因或生物大分子进行受控操作、分析和分选。
● 合成生物学
使用微液滴作为细胞大小的隔间来模拟代谢反应。
● 控制化学和生物反应
微流体工具专门设计用于增强对封装在液滴内的反应的控制。
规格参数
产品名称 | FluoSurf -C/-O 表面活性剂 |
溶剂 | 氟油7500或40或135或200 |
分子式 | PFPE-b-PPO-PEO-PPO-b-PFPE |
分子量 | 7kDa |
电荷属性 | 电中性 |
表面张力(4wt% in HFE7500) | 4 mN/m |
临界胶束浓度CMC(in HFE7500) | 0.2 w/w% |
毒性 | 未分类为危险品,提供MSDS文件。 |
生物兼容性 | 已通过浮游生物、酵母、大肠杆菌和哺乳动物细胞进行测试。 |
微流体芯片兼容性 | 建议对微流控芯片通道表面进行亲氟疏水表面处理 |
储存条件 | 表面活性剂以琥珀色玻璃瓶装运,以防止紫外线降解。 室温下保存1-4年。 |
案例1: 液滴产生和热循环对尺寸分布的影响
实验条件:氟油流速为5μL/min,水相流速为1.66μL/min。
4w/w%表面活性剂HFE7500
热循环条件:30个循环
95℃驻留30s
55℃驻留1min
72℃驻留5min
40℃驻留1min
热循环前
热循环后
FluoSurf在热循环期间允许液滴具有良好的稳定性
使用FluoSurf表面活性剂,热循环对液滴尺寸分布的影响十分有限。
案例2:保留性能
荧光素100μM的全/空液滴平均强度的演变
FluoSurf限制液滴之间的交换(4天后少于10%的荧光素交换)
部分参考文献
Production of Photonic Supraballs Composed of Single-Crystalline Colloidal Arrays through Osmosis-Induced Consolidation ACS Publications : Ye Hun Choi and Shin-Hyun Kim (2023)
Selectable encapsulated cell quantity in droplets via label-free electrical screening and impedance-activated sorting Science Direct: JianweiZhong, Minhui Liang, QiangTang, Ye Ai (2023)
Evaluation
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Machine learning enhanced droplet microfluidics AIP Publishing:
Claire Barnes, Ashish R. Sonwane, Eva C. Sonnenschein, Francesco Del Giudice (2023)
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Nanodroplet-based reagent delivery into water-in-fluorinated-oil dropletsBoZhu, Zhe Du, Yancen Dai, Tetsuya Kitaguchi, Sebastian Behrens, BurckhardSeelig (2023)
Silicon chambers for enhanced incubation and imaging of microfluidic droplets Lab On a Chip: Nicolas Lobato-Dauzier, Robin Deteix, Guillaume Gines, Alexandre Baccouche,Benediktus Nixon Hapsianto, Shu Okumura, Guilhem Mariette, DjaffarBelharet, Samuel Queste, Laurent Jalabert, Matthieu Denoual, Yannick Rondelez, Hiroshi Toshiyoshi, Hiroyuki Fujita, Soo Hyeon Kim, TeruoFujii and Anthony J. Genot(2023)
Evolution of Organic Solvent-Resistant DNA Polymerases ACS Publications: Mohammed Elias, Xiangying Guan, Devin Hudson, Rahul Bose, Joon Kwak, Ioanna Petrounia, KenzaTouah, Sourour Mansour, Peng Yue, Gauthier Errasti, Thomas Delacroix, Anisha Ghosh, and Raj Chakrabarti (2023)
Cell Microencapsulation within Gelatin-PEG Microgels Using a Simple Pipet Tip-Based Device ACS Publications:
Thuy P. T. Nguyen, Fanyi Li, Brendan Hung, Vinh Xuan Truong, Helmut Thissen, John S. Forsythe, and Jessica E. Frith (2023)
Physicochemical Properties Predict Retention of Antibiotics in Water-in-Oil Droplets, ACS Publications: Artur Ruszczak, Pawe?Jankowski, Shreyas K. Vasantham, Ott Scheler, Piotr Garstecki(2023)
High-Throughput Spherical Supraparticle Self-Assembly by Enhanced Evaporation of Colloidal Water Droplets Through Thin Film of Water-Soluble Oil, IEEE Xplore: Wonhyung Lee,JoowonRhee, Joonwon Kim (2023)
Single Hydrogel Particle Mechanics and Dynamics Studied by Combining Capillary Micromechanics with Osmotic Compression, MDPI: Kalpit J. Bakal, Andreas M. A. O. Pollet, Jaap M. J. den Toonder and Hans M. Wyss (2023)
Nanodroplet-based reagent delivery into water-in-fluorinated-oil droplets, Bo Zhu, Zhe Du, Yancen Dai, Tetsuya Kitaguchi, Sebastian Behrens, BurckhardSeelig (2023)
Selectable encapsulated cell quantity in droplets via label-free electrical screening and impedance-activated sorting, Science Direct: JianweiZhong, MinhuiLiang, QiangTang, Ye Ai (2023)
Evaluation of Analyte Transfer between Microfluidic Droplets by Mass Spectrometry, ACS Publications: Emory M. Payne, Maryam Taraji, Bridget E. Murray, Daniel A. Holland-Moritz, Jeffrey C. Moore, Paul R. Haddad, and Robert T. Kennedy (2023)
Measuring single-cell susceptibility 2 to antibiotics within monoclonal 3 bacterial populations, BioRxiv: Lena Le Quellec, Andrey Aristov , Salomé Gutiérrez Ramos, Gabriel Amselem, Julia Bos, Zeynep Baharoglu, Didier Mazel, Charles N. Baroud (2023)
Ultrahigh-Throughput Enzyme Engineering and Discovery in In Vitro Compartments, ACS Publications: Maximilian Gantz, StefanieNeun, Elliot J. Medcalf, Liisa D. van Vliet, Florian Hollfelder (2023)
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EMULSEO 产品系列
氟化表面活性剂:为了获得液滴的良好稳定性
● FluoSurf-C(半固体):基于液滴的标准微流控应用如液滴产生、ddPCR、单细胞分析、单细胞包裹与液滴分选、液滴融合、酶促反应、类器官小球培养、基因治疗等。
● FluoSurf-O(半固体):基于液滴的标准微流控应用如液滴产生、ddPCR、单细胞分析、单细胞包裹与液滴分选、液滴融合、酶促反应、类器官小球培养、基因治疗等,适用于低荧光实验观察的应用需求。
● FluoSurf-S(半固体):更轻的表活分子量,在氟油连续相中具有更高的流动性,专门针对高频液滴产生进行了优化。同时,适用于高温热循环。
● FluoSurf in Fluo-Oil 7500 2w/w%(油相液体):可直接使用,或者用Fluo-Oil 7500油稀释到低浓度后使用。基于液滴的标准微流控应用如ddPCR、单细胞分析、单细胞包裹等
● FluoSurf in Fluo-Oil 7500 5w/w%(油相液体):可直接使用,或者用Fluo-Oil 7500油稀释到低浓度后使用。基于液滴的标准微流控应用如ddPCR、单细胞分析、单细胞包裹等
● FluoSurf in Fluo-Oil 40 2w/w%(油相液体):可直接使用,或者用Fluo-Oil 40油稀释到低浓度后使用。基于液滴的标准微流控应用如ddPCR、单细胞分析、单细胞包裹等
● FluoSurf in Fluo-Oil 40 5w/w%(油相液体):可直接使用,或者用Fluo-Oil 40油稀释到低浓度后使用。基于液滴的标准微流控应用如ddPCR、单细胞分析、单细胞包裹等
注:FluoSurf neat 表面活性剂是一种半固体状态,在使用前,需要用Fluo-Oil 7500和Fluo-Oil 40油按照所需要的质量浓度进行稀释。
氟油:生物相容性氟化油
具有生物相容性,且已被证明可用作液滴产生的连续相。
氟化油是惰性的、生物相容的并允许气体交换,因此非常适合生物应用。
● Fluo-Oil 7500(氟油7500)
氟油7500包含溶解在 HFE-7500 油中的多氟化表面活性剂(<0.1%)。特别推荐用于增溶 FluoSurf 表面活性剂。
Fluo-Oil 7500经过特殊配制,可确保微流体实验的稳定性、生物相容性和可重复性。
● Fluo-Oil 40(氟油40)
氟油40包含溶解在 FC-40 油中的多氟化表面活性剂(<0.1%)。特别推荐用于增溶 FluoSurf 表面活性剂。
Fluo-Oil 40经过特殊配制,可确保微流体实验的稳定性、生物相容性和可重复性。
● Fluo-Oil 135(氟油135)
氟油135包含溶解在 FO135 油中的多氟化表面活性剂(<0.1%)。特别推荐用于稀释 FluoSurf 表面活性剂。
Fluo-Oil 135是氟油7500的一种替代品,经过特殊配制,可确保微流体实验的稳定性、生物相容性和可重复性。从氟油7500更换为氟油135后,实验条件大部分保持不变,实验效果相同或者更好。
表面处理:为了充分的润湿
● Fluo-ST1:疏水表面处理,针对PDMS芯片做了优化。
● Fluo-ST2:疏水表面处理,适用于PDMS,玻璃,PMMA/COC等材料的芯片沟道表面。
● Fluo-ST3:疏水表面处理,适用于PDMS,玻璃,塑料PMMA/COC、Flexdym等材料的芯片沟道表面处理。
对PDMS液滴分选芯片的示例:
以聚二甲基硅氧烷(PDMS)为原料,采用标准软光刻技术制备了微流控器件。通过光刻掩模在硅片上进行紫外曝光制备了SU-8抗蚀剂模具。在PDMS胶(Sylgard 184硅胶弹性体套件)中加入固化剂至最终浓度为10% (w/w),混合,倒在模具上。脱气几分钟,在75°C交联一小时后,将PDMS从模具上剥离,用0.75 mm直径的打孔器在PDMS片上加工输入和输出端口。用透明胶带从端口清除PDMS颗粒,用异丙醇冲洗,用加压氮气干燥。将PDMS板的结构侧与75 × 50 × 1.2 mm的玻璃显微镜载玻片(康宁)结合,将这两个部分暴露在氧等离子体中并将它们压在一起。最后,将Fluo-ST3疏水溶液注入到PDMS器件中(泰初科技(天津)有限公司),静置30秒后,用氩气吹净多余的液体,最后,用氟油7500冲洗沟道表面并用氩气吹净溶液,随后就可以使用PDMS芯片了。
对于导电微流控芯片,PDMS器件被等离子体粘接到75 × 50 × 1.1 mm氧化铟锡玻璃的非导电侧。ITO玻璃的导电面用作反电极。通过使用低熔点焊料(#19铟锡金属)填充整个微通道,将电极集成到系统中。
乳液破乳剂Fluo-Break:破碎乳液滴,得到液滴相即分散相的产物。
结果展示:
微滴微球制备系统(6小时的微球产生)
FluoSurf 0.5w/w% in Fluo-Oil 135 表活氟油在流动聚焦结构的PDMS液滴测序芯片中产生100μm直径的微球(多通道压力真空控制器OB1 MK3+驱动流体流动,BFS1+用于油相液体流量控制器,MFS4和MFS3分别用于控制器中间相和内相液体的恒定流动。)
长时间的稳定、均匀的水滴(油包水液滴小球)产生,多通道压力真空控制器OB1 MK3+在恒定压力模式下驱动两相液体流动,油相为 FluoSurf 表面活性剂。
ddPCR类的PDMS芯片中连续产生长达10小时的均匀水滴(油包水液滴小球),多通道压力真空控制器OB1 MK3+在恒定流量模式下驱动两相液体流动,油相为Emulseo FluoSurf 表面活性剂,经过科式流量计BFS1+进行流量测量,水相样品经过数字流量传感器MFS2进行流量测量。操作界面为ESI软件界面。
FluoSurf 表面活性剂产品的货号信息如下所示
部分芯片套装:
套装1:测试、入门练习和部分液滴微球合成的预实验
常规油包水乳液微球制备套装,用于产生40到150μm之间的液滴微球。
芯片有入口2个(油相入口和水相入口)和出口1个(收集产物),流动聚焦结构(俗称“十字”型结构)。
1,PDMS液滴芯片:2个
2,ST2疏水试剂:1瓶
3,FluoSurf 2w/w% in FO7500表活氟油10mL,纯氟油FO7500 20mL;
4,Tygon软管5米,内径0.50mm,含注射器针头和母鲁尔接头,用于转接到标准的1/16英寸导管的连接;(如果采用注射泵连接,请提前告诉我们,我们增加公鲁尔接头+1/4-28UNF倒锥接头+5米长的PTFE导管)
5,(可选)乳液破乳剂Fluo-Break 1瓶(如果需要打碎液滴,需要选上,默认是不包含乳液破乳剂的)
套装2:10-20小液滴产生芯片或双乳化液滴芯片
用于产生10-20μm的单重乳液滴微球(需要堵住一个入口)或双乳化液滴微球。芯片具有3个入口(内相,中间相和外相)和1个出口(收集产物),流动聚焦结构(俗称“十字”型结构)。
1,PDMS小液滴芯片:3个
2,ST2疏水试剂:1瓶(亲水试剂自备,可以PVA溶液处理沟道表面)
3,FluoSurf 2w/w% in FO7500表活氟油10mL,纯氟油FO7500 20mL;
4,Tygon软管5米,内径0.50mm,含注射器针头和母鲁尔接头,用于转接到标准的1/16英寸导管的连接;(如果采用注射泵连接,请提前告诉我们,我们增加公鲁尔接头+1/4-28UNF倒锥接头+5米长的PTFE导管)
5,(可选)乳液破乳剂Fluo-Break 1瓶(如果需要打碎液滴,需要选上,默认是不包含乳液破乳剂的)
用法一:直接产生油包水类的乳液微球
用法二:产生双乳化液滴微球,一是直接控制内相、中间相和外相的流速,产生所需要直径尺寸的双乳化微球;二是把已经制备的乳液微球注入到内相,中间相注入氟油7500或40或其他液体,以分割液滴微球,产生队列形式;外相通入油相,制备双乳化液滴微球。
套装3:单细胞液滴包裹
用于液滴包裹单细胞,液滴直径范围从50到200μm。芯片具有3个入口和1个出口,流动聚焦结构。
1,PDMS微液滴测序芯片uDrop-Seq:3个
2,ST2疏水试剂:1瓶(亲水试剂自备,可以PVA溶液处理沟道表面)
3,FluoSurf 2w/w% in FO7500表活氟油10mL,纯氟油FO7500 20mL;
4,Tygon软管5米,内径0.50mm,含注射器针头和母鲁尔接头,用于转接到标准的1/16英寸导管的连接;(如果采用注射泵连接,请提前告诉我们,我们增加公鲁尔接头+1/4-28UNF倒锥接头+5米长的PTFE导管)
5,乳液破乳剂Fluo-Break 1瓶(如果不需要,请告诉我们去掉该项)
套装4:液滴介电分选
用于液滴分选功能,芯片具有2个入口和2个出口,2个入口分别是液滴相入口和油相入口,油相用于分割液滴微球,产生有序的队列形式;2个出口用于收集目标产物和废液。一对介电电极结构,施加电场后,实现液滴的介电分选。
1,PDMS小液滴微球分选芯片MEDC-Sorter-sd:3个
2,ST2疏水试剂:1瓶
3,FluoSurf 2w/w% in FO7500表活氟油20mL(可用纯氟油FO7500稀释到低质量浓度如1wt%),纯氟油FO7500 20mL;
4,Tygon软管5米,内径0.50mm,含注射器针头和母鲁尔接头,用于转接到标准的1/16英寸导管的连接;(如果采用注射泵连接,请提前告诉我们,我们增加公鲁尔接头+1/4-28UNF倒锥接头+5米长的PTFE导管)
5,介电金属电极#19铟锡:2个,正方形,50×50 mm,60-70℃融化成液体状态,可注入到PDMS沟道里面形成良好的导电电极。
套装5:玻璃液滴芯片(7-15 μm直径液滴微球 - 油包水和水油包类型)
玻璃材质的液滴芯片,流动聚焦结构,沟道深度10μm,可产生7到15μm之间的液滴微球。配有标准的芯片夹具,直接连接外径1/16英寸导管。沟道堵塞后,可用弱酸或弱碱溶液疏通沟道。该玻璃芯片可反复使用。
两种用法:一是产生水包油类的微球;二是产生油包水类的微球(需要用疏水试剂ST2处理沟道表面,形成疏水状态)
1,流动聚焦液滴玻璃芯片:2个
2,玻璃芯片夹具:1个
3,疏水试剂ST2:1瓶
5,FluoSurf 2w/w% in FO7500表活氟油20mL(可用纯氟油FO7500稀释到低质量浓度如1wt%),纯氟油FO7500 30mL;
套装6:玻璃液滴芯片(25-45 μm直径液滴微球 - 油包水和水油包类型)
玻璃材质的液滴芯片,流动聚焦结构,沟道深度33μm,可产生25到45 μm之间的液滴微球。配有标准的芯片夹具,直接连接外径1/16英寸导管。沟道堵塞后,可用弱酸或弱碱溶液疏通沟道。该玻璃芯片可反复使用。
两种用法:一是产生水包油类的微球;二是产生油包水类的微球(需要用疏水试剂ST2处理沟道表面,形成疏水状态)
1,流动聚焦液滴玻璃芯片:2个
2,玻璃芯片夹具:1个
3,疏水试剂ST2:1瓶
4,PTFE毛细导管10米,外径1/16英寸,内径0.25mm;
5,FluoSurf 2w/w% in FO7500表活氟油20mL(可用纯氟油FO7500稀释到低质量浓度如1wt%),纯氟油FO7500 30mL;
套装7:玻璃液滴芯片(90-150 μm直径液滴微球 - 油包水和水油包类型)
玻璃材质的液滴芯片,流动聚焦结构,沟道深度120μm,可产生90到150 μm之间的液滴微球。配有标准的芯片夹具,直接连接外径1/16英寸导管。沟道堵塞后,可用弱酸或弱碱溶液疏通沟道。该玻璃芯片可反复使用。
两种用法:一是产生水包油类的微球;二是产生油包水类的微球(需要用疏水试剂ST2处理沟道表面,形成疏水状态)
1,流动聚焦液滴玻璃芯片:2个
2,玻璃芯片夹具:1个
3,疏水试剂ST2:1瓶
4,PTFE毛细导管10米,外径1/16英寸,内径0.25mm;
5,FluoSurf 2w/w% in FO7500表活氟油20mL(可用纯氟油FO7500稀释到低质量浓度如1wt%),纯氟油FO7500 30mL;
套装8:可拆卸双重乳液滴毛细管玻璃芯片(50-200 μm直径的双乳化液滴微球)
可拆卸双重/双乳化液滴毛细管玻璃芯片采用锥型玻璃毛细管嵌套而成,锥型毛细管可随时更换,极大降低了液滴微球产生的使用成本。螺纹接口采用标准的1/4-28UNF倒锥接头连接,适配外径1/16英寸的PTEF毛细导管。主要优势如下:
1,锥型毛细管嵌套而成,可随时更换毛细管;
2,降低了使用成本
3,自由调节锥型毛细管的间距
4,适配标准的1/4-28UNF倒锥接头连接
5,可产生50 到 200μm的双乳化微球
6,通过自主更换锥型玻璃管后可产生不同类型的微球如W/W/O、O/O/W、O/W/O、W/O/W等
7,包含配套的连接配件
8,配备5套锥型玻璃毛细管,可随时更换。
可拆卸双重/双乳化液滴毛细管玻璃芯片套装包含的组件如下:
1,可拆卸双重/双乳化液滴毛细管玻璃芯片主体:1个
2,锥型玻璃毛细管:5套(10根)
3,方型管:1个
4,连接接头配件一套
5,疏水试剂ST2: 1瓶
如您还有其他问题,请随时联系我们。
相关应用介绍
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基于微技术方法的类器官模型(2020年10月),点击 here
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