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- 【导读】在ELISA中,进行各项实验条件的选择十分重要,包括:1.固相载体的选择:载体的种类有多种,如聚苯乙烯,聚氯乙烯和纤维素等,我们通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板,其优点在于吸附蛋白的...
在ELISA中,进行各项实验条件的选择十分重要,包括:
1.固相载体的选择:
载体的种类有多种,如聚苯乙烯,聚氯乙烯和纤维素等,我们通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板,其优点在于吸附蛋白的性能较好,操作简便、用量小、适于大批检测。
2.载体的吸附条件:
载体的吸附均为物理吸附,吸附一般要求PH在9.0~9.6之间。时间、温度、蛋白的浓度、离子的强度一定要恰到好处。一般采用4℃过液。
3.酶标抗体使用浓度的确定:
于聚苯乙烯板中加足够的抗体包被温育一定时间,酶标结合物倍比稀释,找出OD值1,为Z合适酶标抗体稀释度。
4.抗原的要求:
用于ELISA的抗原必须采用相当纯的抗原,如果含有其它杂质,将与抗原共同竞争的固相载体上的有限位置。
5.抗体的要求:
一定是要与抗原对应的抗体,化学结构和空间结构上其具有很高特异性反应。
6.反应时间:
抗原与抗体、抗体与酶标抗体反应一般在37度1~2小时达到高峰。时间太短敏感性下降,时间太长吸附的抗原或复合物可能脱落。剑钝生物科技(上海)有限公司主营实验技术服务SCI论文服务,试剂盒,细胞株等。“高标准、高要求、高质量”,欢迎广大科研人员前来咨询,购买。
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- 2004-09-18 09:23:03
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