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- 【导读】细胞系方法介绍。第一、洗涤很重要:洗涤步骤看似很无聊,其实很重要,因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中...
细胞系方法介绍。
diyi、洗涤很重要:洗涤步骤看似很无聊,其实很重要,因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。
第二、封闭更关键:封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、ELISA试剂盒吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
第三、抗体浓度须优化:ELISA实验我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤,ELISA试剂盒但是如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。记住,非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
第四、检测试剂要适量:另一点也很显而易见:切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。
细胞系HEM-lmiRNA人表皮黑色素细胞-浅色素微小RNA1g
HEM-mmiRNA人表皮黑色素细胞-中色素微小RNA1g
HEM-dmiRNA人表皮黑色素细胞-深色素微小RNA1g
HEF-fmiRNA人成纤维细胞-胎儿微小RNA1g
HEF-nmiRNA人成纤维细胞-新生儿微小RNA1g
HEF-amiRNA人成纤维细胞-成人微小RNA1g
HHDPCmiRNA人毛乳头细胞微小RNA1g
HHGMCmiRNA人SF基质细胞微小RNA1g
HHORSCmiRNA人毛囊外根壳细胞微小RNA1g
HHIRSCmiRNA人毛囊内根壳细胞微小RNA1g
HLECmiRNA人淋巴内皮细胞微小RNA1g
HLFmiRNA人淋巴成纤维细胞微小RNA1g
HOKmiRNA人口腔角质细胞微小RNA1g
HGFmiRNA人牙龈成纤维细胞微小RNA1g
HPLRmiRNA人牙周膜成纤维细胞微小RNA1g
HEEpiCmiRNA人食道上皮细胞微小RNA1g
HESMCmiRNA人食道平滑肌细胞微小RNA1g
HIMECmiRNA人肠微血管内皮细胞微小RNA1g
HISMCmiRNA人肠平滑肌细胞微小RNA1g
HCSMCmiRNA人结肠平滑肌细胞微小RNA1g
HPMECmiRNA人肺微血管内皮细胞微小RNA1g
HPAECmiRNA人肺动脉内皮细胞微小RNA1g
HPASMCmiRNA人肺动脉内皮细胞微小RNA1g
HPAFmiRNA人肺动脉成纤维细胞微小RNA1g
HPAEpiCmiRNA人肺泡上皮细胞微小RNA1g
HBEpiCmiRNA人支气管上皮细胞微小RNA1g
HTEpiCmiRNA人气管上皮细胞微小RNA1g
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- 2004-09-26 09:23:04
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