小鼠原代细胞样本处理及要求说明书

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【导读】小鼠原代细胞样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据...

小鼠原代细胞样本处理及要求：
1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠原代细胞HBSS平衡盐溶液500ml
PLL多聚赖氨酸1mg/ml1ml
PLL多聚赖氨酸10mg/ml1ml
FBS胎牛血清500ml
P/S青霉素/链霉素溶液5ml
P/S青霉素/链霉素溶液100ml
AMS抗真菌溶液50ml
ABAMS抗霉菌溶液50ml
CCGW细胞培养超纯水500ml
MDS肌细胞分离液100ml
BPE牛脑垂体提取物25mg
BPE牛脑垂体提取物100mg
ITS胰岛素铁硒传递蛋白100x10ml
L-Gue左旋谷氨酰胺溶液200mM100ml
NEAA非必需氨基酸100X100ml
BPF纤维粘连蛋白-牛源1mg
ColI型胶原细胞检测试剂盒48tests/48wellplate
Fibro纤维母细胞粘附检测试剂盒48tests/48wellplate
MTTMTT细胞活力和增殖检测试剂盒1000tests/96wellplate
WSTWST-1细胞活力和增殖检测试剂盒1000tests/96wellplate
CSA细胞衰老检测试剂盒50tests/53mmplate
GalCβ-半乳糖苷酶比色检测试剂盒50tests/53mmplate
LDHLDH细胞毒性检测试剂盒500tests/96wellplate
TUNELTUNEL色标法细胞凋亡检测试剂盒50tests/96wellplate
NO一氧化氮色标法检测试剂盒250tests/96wellplate
pNPP硝基苯磷酸钠（pNPP）磷酸酶检测试剂盒500tests/96wellplate
MGmP孔雀绿磷酸盐检测试剂盒2500tests/96wellplate
CCA比色法钙分析试剂盒250tests/96wellplate
CSK活/死细胞染色试剂盒1000tests/96wellplate
GAPDH比色法GAPDH分析试剂盒1000tests/96wellplate
IVTFA体外管腔形成分析试剂盒50tests/96wellplate
TACA总抗氧化能力检测试剂盒100tests
C3DGK胶原I-3D凝胶试剂盒100mg
CCCSCK
SOD超氧化物歧化酶分析试剂盒100tests
MYCO支原体PCR检测试剂盒100tests
CAT过氧化氢酶活性分析试剂盒100tests
CAS细胞凋亡蛋白酶-3分析试剂盒100tests小鼠原代细胞

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2004-09-26 09:23:04

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