固相膜免疫检测技术

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【导读】固相膜免疫测定（solidphasemembrane-basedimmunoassay）与固相酶免疫测定（ELISA）相类似，其特点为以微孔膜作为固相。标记物可用酶和各种有色微粒子...

固相膜免疫测定（solidphasemembrane-basedimmunoassay）与固相酶免疫测定（ELISA）相类似，其特点为以微孔膜作为固相。标记物可用酶和各种有色微粒子如彩色胶乳、胶体金、胶体硒，以红色的胶体金Z为常用。固相膜的特点在于其多孔性。像滤纸一样，固相膜可被液体穿过流出，液体也可以透过毛细管作用在膜上向前移行。利用这种性能建立了两种不同类型的快速检测方法。

在固相膜免疫测定中，穿流形式的称为免疫渗滤试验（immunofiltrationassay，IFA）；横流形式的称为免疫层析试验（immunochromatographieassay，ICA）。因常用胶体金作为标记物，国内文献中称前者为免疫金溶胶斑点法和滴金免疫测定法等，称后者为胶体金免疫层析法等，统称“金标”。

固相膜
膜是固相膜免疫测定试剂的主要原材料，对于试剂的质量起决定性作用。常用的膜为硝酸纤维素膜。硝酸纤维素膜本身为疏水性，在膜的制作过程中加入了表面活性剂，成为亲水性，对蛋白质有很强的吸附性能。在选择合适的硝酸纤维素膜时应注意以下特征。

1．孔径即能通过粒子的大小，以微米（Atm）表示。用于穿流法的膜一般选择0．4um左右，用于横流法的膜可选择5～lOum。

2．流速以ml／（cm2min）表示。流速与孔径有一定关系，孔径越大，流速快。在横流法中选择合适的膜时，流速较孔径更有参考价值。

3．蛋白质结合力以ug／cm2表示。

4。均一性优质的膜应具有良好的均一性，这样才能保证试剂批号内的均一性。

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2004-11-06 09:23:05

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