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- 【导读】高效凝胶色谱仪分析中不具有分配、吸附和离子交换作用,是基于样品分子尺寸和形状不同实现分离的。一、工作原理:小分子可以扩散到凝胶空隙中通过,出峰最慢。中等分子只能通过部分凝胶空隙,中...
GX凝胶色谱仪分析中不具有分配、吸附和离子交换作用,是基于样品分子尺寸和形状不同实现分离的。
一、工作原理:
小分子可以扩散到凝胶空隙中通过,出峰Z慢。
中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过。
大分子被排斥在外,出峰Z快。
二、固定相:
1、半刚性凝胶:
为高交联度的聚苯乙烯,孔径范围较宽。
常以有机溶剂作流动相。
2、刚性凝胶:
为多孔硅胶。
可用水溶性溶剂和有机溶剂作流动相。
可在较高压强和较高流速下操作,但易拖尾。
三、流动相:
常用流动相有甲苯、苯、CH2Cl2、CHCl3、CCl4、四氢呋喃和水溶液等。
1、能溶解样品。
2、不应造成填料太大的溶胀和收缩。
3、控制pH和离子强度,可消除非排除机理的影响。
4、尽量降低溶剂粘度(加电介质)。
5、选择与样品折射率差别大的溶剂。
四、特点:
1、样品全部在溶剂的保留时间前洗脱。
2、色谱柱内的峰扩展较小。
3、.峰较窄,有利于检测。
4、.采用示差检测器。
五、不足:
1、峰容量小。
2、不能分离大小相似和分子量接近的样品。
六、应用:
适用于分子量不同的大分子样品(Mr>2000)的分离。
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- 2004-11-27 09:41:07
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