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- 【导读】前言:我们大家都知道生物实验中有个重要的实验就是酶特性的实验,那么在做实验时有一个用来对酶进行做标记的仪器就是酶标仪,我们并不是特别的了解酶标仪,知识知道它的作用而已。下面就由小编...
前言:我们大家都知道生物实验中有个重要的实验就是酶特性的实验,那么在做实验时有一个用来对酶进行做标记的仪器就是酶标仪,我们并不是特别的了解酶标仪,知识知道它的作用而已。下面就由小编为大家做一下酶标仪的简单介绍,希望对大家了解酶标仪有所帮助。
酶标仪介绍:主要由光源系统、单色器系统、样品室、探测器和微处理器控制系统等组成酶标仪原理:实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同.如图是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光线经过滤光片或单色器后,成为一束单色光。该单色光束经过酶标板中的待测标本,被标本吸收掉一部分后,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号。光电检测器将投照到上面的光信号的强弱转变成电信号的大小。此电信号经前置放大、对数放大、模数转换等处理后,送人微处理器进行数据处理和计算,Z后通过显示器和打印机输出测试结果。酶标仪的分类:按照滤光方式的不同可分为:滤光片式的酶标仪和光栅式酶标仪按照功能可以分为:光吸收酶标仪,荧光酶标仪,化学发光酶标仪和多功能的酶标仪滤光片式的酶标仪:采用滤光片来进行波长的选择,酶标仪内置滤光片轮,可选择试验所需的不同波长的滤光片来进行分光,光源发出的全波谱光经过滤光片后,大部分被过滤,只剩下滤光片本身允许的波长通过,这样就可就通过滤光片来获得特定的波长光栅式酶标仪:采用光栅进行分光,光源发出的全波谱光线经过光栅后,通过光栅上面分布的一系列狭缝的分光,就可以获得任意波长的光,波长连续可调,一般递增量为1nm.光吸收酶标仪:用来进行可见光与紫外光吸光度的检测.特定波长的光通过微孔板中的样品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系,由此可以用来定性和定量的检测。荧光酶标仪:用来进行荧光的检测.通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器.荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例化学发光酶标仪:来自生物化学反应中的自发光,可分为辉光型和闪光型两种类型.辉光型发光持久,稳定,能持续一段时间;闪光型发光时间短,变化快,稳定性不强,需要应用自动加样器才可以进行多功能的酶标仪:可以同时进行光吸收,荧光和化学发光的检测优缺点:名称:优点:缺点:滤光片式酶标仪通过选择不同的滤光片可获得不同的波长因滤光片固定所以波长都是固定并且滤光片价格比较昂贵光栅式酶标仪使用方便灵活可以进行全波长的扫描价格贵光吸收酶标仪检测检测技术成熟,成本低,操作简单动态范围窄,灵敏度比较低,特异性不强荧光酶标仪灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样易受外界干扰激发光与发射光容易互相影响化学发光酶标仪辉光型发光持久稳定,能持续一段时间闪光型发光时间短,变化快,稳定性不强多功能的酶标仪功能强大,使用范围广避免了重复购买价格昂贵酶标仪安装环境要求:仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。仪器应放置在低于40分贝的环境下。为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。操作时环境温度应在15℃-40℃之间,环境湿度在15%-85%之间。操作电压应保持稳定。操作环境空气清洁,避免水汽,烟尘。保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。酶标仪的检测流程:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,Z后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。酶标仪的八大特性功能:一、测定波长。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)。二、测定的吸光度范围。通常,酶标仪的吸光度测定范围在。0-2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0-2.5之间,但现在基本上都做了拓宽,可达到3.5以上,并且能保持很好的精密度与线性。三、光学系统。酶标仪的光学系统采用的是垂直光路多通道(通常为8或12通道,亦有单通道)检测,一般为硅光管或光导纤维,除测定通道外,有的酶标仪还有一个参比通道,每次测定可进行自我校准。酶标仪的光学系统功能如何,均可通过酶标仪测定的吸光度范围、线性度、精密度和准确度等体现出来。四、检测速度。酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。检测速度快,有利于提高检测的精密度,即避免由于测定过程中,因测定时间不同所致的各微孔间吸光度间的差异。目前市场上常见的酶标仪检测速度都非常快,通常在数秒钟内。五、震板功能。酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀,使板孔内颜色均一。目前市场上常见的酶标仪均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节。六、温育功能。温育功能是指酶标仪本身能按要求自动精确地控制仪器内部的温度,使得ELISA测定中微孔板条的温育过程可在仪器内部完成,而无需再外配温箱。目前,只有少部分酶标仪具有此种功能七、软件功能。软件功能是指酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶标动力学、紫外和凝集等数据的统计分析并报告结果的功能。软件功能是中酶标仪的一个非常重要的功能。如果硬件方面区别不大,则软件就成为判定酶标仪优劣的惟一指标。对于用户来说,好的软件功能,对实际工作会有较大的帮助。八、语言界面。通常进口的中酶标仪人机对话多采用英文。这对于某些基层实验室可能会存在语言方面的困难,从而难以Zda限度地发挥酶标仪的作用。为解决这方面的问题,已有一些酶标仪采用了中文界面酶标仪使用时注意事项:在测量过程中,请勿碰酶标板,以免酶标板传送时挤伤操作人员的手请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。仪器如果接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒洗板要洗干净。尽量使用洗板机洗板,避免交叉污染。严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。使用加液器进行加液,加液头不能混用。不要在测量过程中关闭电源。对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,可以根据实际情况及时修改参数,以达到Z佳效果。使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格按照试剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。使用后盖好防尘罩。出现技术故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。常见故障:1、打印机不工作酶标仪后部DIL开关设置不正确。酶标仪内置打印机开关处于开的位置。在总参数中设置内置打印机为关。打印机无纸或纸未装好,请装好打印纸。打印机未联机,请确认打印机上的联机键已联机打印机接口接错(接在了计算机接口上了)。应将打印机联系接在DIL开关正下方的打印机接口上,RS-232接口为计算机接口。打印机联线有问题:有些配备的新打印机联线仍有问题,请确保打印机联线无问题。打印机有开机顺序,需先开打印机,后开仪器;有的需先开仪器,后开打印机。2、调不出所编辑程序如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。空白或阴性位置不正确。肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大。滤光片设置不正确:请在“参数”中按滤光片轮中实际的情况设置滤光片。酶标仪的应用范围:不仅应用在YL行业,用于酶联免疫学的检测工作,而且在食品卫生,农业,畜牧等产业以及各高等院校实验室中都有广泛的应用。在医学上采用酶联免疫吸附试验进行血液学,免疫学,肿瘤免疫学,传染病免疫学,优生优育的血清学及基因实验。检测项目主要包含以下几项:1,传染病类:例如肝炎,艾滋病,衣原体,肺炎支原体,梅毒,水痘等2,甲状腺:促甲状腺激素,T3T4等3,不孕症:性激素六项,泌乳素,雌三醇,生长素,抗精子抗体等4,优生优育:弓形虫抗体,巨细胞病毒,风疹病毒等5,肿瘤标志物:癌胚抗原,甲胎蛋白,乳腺癌,卵巢癌,膀胱癌,胃肠癌等6,糖尿病:C肽,胰岛素,胰岛素抗体,胰岛素原等7,过敏原,皮肤不耐受等在食品以及农畜业的检测项目包括:营养成分,添加剂,农药残留量,菌毒素,无机毒素,抗生素激素残留,致癌物质残留,有毒有害物质污染等。以上就是上海旦鼎国际贸易有限公司为大家介绍的酶标仪的有关知识,如有需要转载敬请说明,谢谢!仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-11-27 09:41:32
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