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- 【导读】ELISA试剂盒标准曲线的绘制选择什么方程去拟合?做校准曲线时,曲线拟合类型是选择线性还是二次方程(曲线),二者哪一个更精确?这两个问题几乎是刚开始接触所有做ELISA实验的新手必...
ELISA试剂盒标准曲线的绘制选择什么方程去拟合?做校准曲线时,曲线拟合类型是选择线性还是二次方程(曲线),二者哪一个更精确?这两个问题几乎是刚开始接触所有做ELISA实验的新手必问的问题。因为标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。恒远技术为您总结以下要点:
在S曲线的低浓度部门可以用乘幂方程很好的拟合,中低浓度部门可以用直线方程,中间部门可用对数方程,而中后段可用四参数。免疫检测时尺度点(可以是倍比稀释的,也可以不是)浓度假如和相应的吸光度(OD)值假如能够呈现直线关系当然是Z理想的了,这时可以通过EXELL等利便的获得拟合曲线,进而推算出样品的浓度值。
关于尺度曲线的拟合方式,直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA及其它生物学反应中的曲线拟合,但都只合用于曲线的一部门,有的合用于前半段,有的合用于后半段,有的合用于中间一段,而Logistic曲线则对曲线的全部都有较好的合用性。在一个长的区间内,Logistic应该都能拟合得较为理想。假如用来定量,S形曲线的中间段(较陡处)是比较好的,而两真个平坦部门计算误差会大,有时甚至会很大。用于免疫检测的所谓“尺度曲线"实在称为拟合曲线比较合适。目前国际上Z流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合",用这种拟合方式往往能够比较精确的反映浓度和吸光度的曲线关系,从而进一步比较准确的获得样品中待测物质的浓度值。但我们做免疫检测很少有时候能够有这么理想的情况,标品浓度和相应OD值往往是"S"型的曲线关系,这时就不能用直线拟合的方式了,而对拟合方法进行选择就是必要的了。枢纽在于你的尺度曲线做到了S形的哪一部门,你想检测的样品浓度在曲线的哪一部门。人ELISA试剂盒当然,假如用于定量,仍是在中间一段较好。但建模型是一回事,而用它来定量是另一回事。这些方法固然没有一种方法可以通用,但也都可以用。但并不是说它就是wan能的。事实上不仅是ELISA,其它良多生物学反应都是S形曲线,也都可以用Logistic曲线拟合。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-11-28 09:23:14
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