大鼠胰岛素试剂盒详细操作步骤

大鼠胰岛素试剂盒详细操作步骤

实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加标准品：在酶标包被板上设标准品孔，ELISA试剂盒依次加入不同浓度的标准品50ul（建议每个浓度做2个平行孔）人ELISA试剂盒。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。大鼠ELISA试剂盒在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀小鼠ELISA试剂盒。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟ELISA试剂盒。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，大鼠ELISA试剂盒每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干小鼠ELISA试剂盒。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外ELISA试剂盒。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟人ELISA试剂盒.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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