针对植物组织样本处理有哪些方法?

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【导读】一些常见的样本的处理是科研实验中最基本的,相信很多科研工作者都是了解和清楚的,但是植物组织样本该怎样处理,相信很多科研朋友就是一头雾水,但是没有关系,上海沪鼎带您从专业的角度来了解...

一些常见的样本的处理是科研实验中Z基本的,相信很多科研工作者都是了解和清楚的,但是植物组织样本该怎样处理,相信很多科研朋友就是一头雾水,但是没有关系,上海沪鼎带您从专业的角度来了解植物组织样本的处理方法.
一、匀浆介质
一般采用0.05mol/LTris-HCl,pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
二、组织匀浆的制备
1、取组织块（0.2g～0.5g）Z少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。
①手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成20%的匀浆液。
②机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000转/分上下研磨制成20%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间），
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片（直接涂片、染色均可以），显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
三、样本保存:
植物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中间如不反复冻融，-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。

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2004-12-02 09:23:10

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