- 大连化学物理研究所 | 姬广军博士后发表论文,影响因子12.9
- 青岛普仁仪器应邀参展 Cials成都分析测试实验室技术设备展
- City不City?瑞士万通水分仪就在这里,欢迎大家来!
- 助力中国芯——溶解氮在半导体机能水中的应用
- 文献解读|哈尔滨工业大学贺金梅团队等《Materials》:共固化法制备CFRP和EPDM复合材料的工艺优化
- 展会预热 | 第十五届中国光博会,如海诚邀您的莅临!
- 认识Kevin|泰勒霍普森大中华区总经理
- 客户故事|UEI 确保海冰动力学实验的数据采集可靠性
- 【结课集锦】异宠顺利结课!内含11个课程重点提问及董老师答案解析,速进学习!
- 金相抛光液和金相抛光粉的区别,看完这篇你就懂了!
- 食用油质量安全快速检测解决方案
- 《人民日报》刊文 | 量子精密测量:变“不可见”为“可见”
- 如海小课堂 | 什么是近红外光谱仪?
![上海长方光学仪器有限公司](http://yiqi-oss.oss-cn-hangzhou.aliyuncs.com/aliyun/Manage/2018-07-06/20180706-2055212137.jpg)
- 来源:内容来源于网络 浏览量:222次
- 【导读】牛乙酰辅酶A(A-CoA)ELISA试剂盒实验注意事项本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛乙酰辅酶A(A-CoA)水平。用纯化的牛乙酰辅酶A(A-Co...
牛乙酰辅酶A(A-CoA)ELISA试剂盒实验注意事项
本试剂盒仅供研究使用。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛乙酰辅酶A(A-CoA)水平。用纯化的牛乙酰辅酶A(A-CoA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入乙酰辅酶A(A-CoA),再与HRP标记的乙酰辅酶A(A-CoA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰辅酶A(A-CoA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛乙酰辅酶A(A-CoA)浓度。
牛乙酰辅酶A(A-CoA)ELISA试剂盒组成
130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(960pmol/L)0.5ml×1瓶
3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶
4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
牛乙酰辅酶A(A-CoA)ELISA试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
480pmol/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
240pmol/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
120pmol/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
60pmol/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
30pmol/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
牛乙酰辅酶A(A-CoA)ELISA试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔diyi孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照牛乙酰辅酶A(A-CoA)ELISA试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词:
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
- 2004-12-12 13:21:39
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
-
随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
BURKERT(宝德)电磁阀选型注意事项2004-11-29 09:23:29
BURKERT(宝德)电磁阀选型注意事项今天我们索菲特给大家带来的技术文章是有关宝德电磁阀的选型注意事项,之
-
拉力机换油的注意事项2005-01-29 09:23:05
拉力机换油的注意事项拉力机换油很重要,那么换什么油才是最合适的?下面就由扬州鑫天汇的工程师给大家详细的介绍一
-
恒温恒湿试验箱注意事项及保养2006-01-21 09:37:39
恒温恒湿试验机在使用的过程中,有很多注意事项,也需要经常保养,这样可以延长试验箱的使用寿命。下面是该产品的注
-
sy-2沙浴的安装与使用和注意事项2006-11-04 13:32:18
sy-2沙浴的安装与使用和注意事项1.放在干燥的平台上,在电源连接处安装单相三级插座,在
-
低速离心机注意事项及故障检测2004-07-05 09:14:03
低速离心机可广泛应用于临床医学、生物化学、免疫学、血站等领域,是实验室中用于离心沉淀的常规仪器。低速离心机注
-
学习双重石英蒸馏水器的使用注意事项2004-07-05 09:14:03
使用注意事项:一、外壳须接地良好,以免出现危险。二、每次使用前应洗刷锅内部一次,排尽存水,更换新水。注
-
4002液氮罐使用时的注意事项2004-07-05 09:14:04
4002液氮罐使用时的注意事项分析: 1、为保证4002液氮罐使用的安全、可靠,液氮罐只能充装液氮、液
-
浊度计使用注意事项2004-07-06 08:51:50
浊度计使用注意事项 浊度计可以广泛应用于发电厂、自来水厂、生活污水处理厂、饮料厂、环保部门、工业用水、制
-
三菱卡尔费休水分测定仪使用注意事项2004-07-06 08:51:50
三菱卡尔费休水分测定仪使用注意事项: 1、仪器必须放在干燥清洁的环境中,并安排专人保管。如果长期不用,
-
管式电阻炉的使用注意事项2004-07-06 08:51:50
烘炉注意事项:a:烘炉通蒸汽时必须先脱水,缓慢进行,防止水击。b:炉膛分别升至150℃、320℃时恒温,目的
牛乙酰辅酶A(A-CoA)ELISA试剂盒实验注意事项
-
您可能感兴趣
![](https://static.yiqi.com/Pingce/img/imgddd.png)
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi