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- 【导读】进口酶联免疫Elisa试剂盒操作方法双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4...
进口酶联免疫Elisa试剂盒操作方法
双抗体夹心法
1.包被:用0.05MPH9.碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过一夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
间接法
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过一夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.’Z后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。
进口酶联免疫Elisa试剂盒ELISA小鼠可溶性CD36分子(mousesCD36)进口分装48T/96T
ELISA小鼠sCD40配体(mousesCD40Ligand)进口分装48T/96T
ELISA小鼠CD34(mouseCD34)进口分装48T/96T
ELISA小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(mousesCD40L)进口分装48T/96T
ELISA小鼠补体C3a(mouseC3a)进口分装48T/96T
ELISA小鼠补体C5a(mouseC5a)进口分装48T/96T
ELISA小鼠血清总补体(mouseCH50)进口分装48T/96T
ELISA小鼠肌酸激酶(mouseCK)进口分装48T/96T
ELISA小鼠肌酸激酶同工酶(mouseCK-MB)进口分装48T/96T
ELISA小鼠羟甲基赖氨酸(mouseCML)进口分装48T/96T
ELISA小鼠C-肽(mouseC-peptide)进口分装48T/96T
ELISA小鼠心肌钙蛋白T(mousecTnT)进口分装48T/96T
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ELISA小鼠巨噬细胞集落刺激因子(mouseM-CSF)进口分装48T/96T
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ELISA小鼠D-二聚体(mouseD-Dimer)进口分装48T/96T
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- 2005-01-27 09:23:08
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