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- 【导读】紫外可见光光度法的定性应用主要可分为两种,一种是定性鉴别,另外一种是纯度检查,小编今天将用详细的例子来给大家介绍一下:1.未知物的定性鉴别紫外可见分光光...
紫外可见光光度法的定性应用主要可分为两种,一种是定性鉴别,另外一种是纯度检查,小编今天将用详细的例子来给大家介绍一下:
1.未知物的定性鉴别
紫外可见分光光度法可用于对不饱和有机化合物,尤其是对具有共轭体系的有机化合物进行定性鉴别和结构分析,推测未知物的骨架结构。定性鉴别方法有两种,一种是比较吸收光谱法,另一种方法是根据经验规则计算Zda吸收波长,然后与实测值比较。
(1)比较吸收光谱法
两个样品若是同一化合物,其吸收光谱应完全一致。在鉴定时,为了消除溶剂效,应将样品和标准品以相同浓度配制在相同溶剂中,在相同条件下分别测定其吸收光谱,比较两光谱图是否一致(包括曲线形状、入max、吸收峰数目、拐点及emax)。为了进一步确证,可再用其他溶剂分别测定,若吸收光谱仍然一致,则进一步肯定两者是同一物质。
如果没有标准物,则可借助各种有机化合物的紫外可见标准谱阁及有关电子光谱的文献资料进行比较。Z常用的谱阁资料是萨特勒标准谱阁及手册,由美国费城Sadtler研究实验室编辑出版。
(2)经验规则计算Zda吸收波长法
当采用其他物理或化学方法判断某化立物的几种结构吋,可用经验规则计算Zda吸收波长,并与实测值进行比较,然后确定物质的结构。常用的经验规则有Woodward-Fieser规则和Scott规则。
紫外吸收光谱只能表现化合物生色团、助色团和分子母核,而不能表达整个分子的特征,因此只靠紫外吸收光谱曲线来对末知物进行定性是不可靠的,还要借助一些其他方法如红外光谱法、核磁共振波谱、质谱,以及化合物某些物理常数等配合来确定。
2.纯度检查
(1)杂质检查
如果化合物在某波长下有较强的吸收峰,而所含杂质在此波长处无吸收峰或吸收很弱,杂质的存在将使化介物的吸光系数值降低;若杂质在此吸收峰处有比化合物更强的吸收,杂质的存在将使化合物的吸光系数值增大。这些都可作为检查杂质是否存在的方法。但是,被检查的化合物必须已经鉴别确证后,才能认为光谱数据或形状的改变是由杂质存在引起的。如果化合物在紫外可见光区没有明显吸收,而所含杂质有较强的吸收,那么,有少量杂质就可以紫外可见分光光谱检查出来。例如乙醇和环己烷中若含有少量杂质苯,苯在256nm处有吸收峰,而乙醇和环己烷在此处无吸收,即使乙醇中含苯量低达10mg/mL,也能从光谱中检出。
(2)杂质的限量检查
在食品、药品等行业中,对有些杂质需有限量要求。例如肾上腺素的合成过程中有一种中间体肾上腺酮,在它还原成肾上腺素过程中由于反应不够完全而带入到产品中,成为肾上腺素的杂质而影响肾上腺素的LX。因此,肾上腺酮的量必须规定在某一限量之下。在0.05mol/LHCl溶液中肾上腺素与肾上腺刚的紫外吸收光谱有显著不同,在310nm处肾上腺酮有吸收峰,而肾上腺素没有吸收,可以利入max=310nm检测肾上腺酮的含量。该法是将肾上腺素的制成品用0.05mol/LHC1溶液制成2mg/mL的溶液,在lcm吸收池中于310nm处测定吸光度A,规定吸光度不能超过0.05,相当于含肾上腺酮不超过0.06%。
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