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- 【导读】摘要:采用反相高效液相色谱法同时分离测定4种长春花吲哚类生物碱。以水:二乙胺=986:14,用磷酸调节pH=7.2(溶液A),甲醇:乙腈:4:1(溶液B),380 ml A和620 ml B混合作为...
摘要:采用反相GX液相色谱法同时分离测定4种长春花吲哚类生物碱。以水:二乙胺=986:14,用磷酸调节pH=7.2(溶液A),甲醇:乙腈:4:1(溶液B),380 ml A和620 ml B混合作为流动相,流速2 ml/min,进样量10μL,220 nm下检测,以恒流洗脱方式在25 min内分离了长春碱等4种成分。同时还研究了流动相组成、pH值等对分离效果的影响。对实际样品分析,取得了较好结果。
关键词:反相GX液相色谱,吲哚类生物碱
1 引 言
长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春质碱(Catharanthine)、文多灵(Vindoline)是夹竹桃科植物长春花(Catharanthus roseus L.G.Don)中所含有的4种重要的吲哚类生物碱。目前长春碱类生物碱主要还是从长春花植物中提取,建立长春花中这4种生物碱的快速检测对长春花GAP种植和建立质量评价体系具有重要意义。已经报道的长春碱类生物碱的含量测定方法有薄层扫描法 、GX液相色谱法 及放射性免疫测定法 等。但对4种生物碱同时测定,国内尚未见报道。本研究在以往文献的基础上,建立了快速测定4种吲哚类生物碱的反相GX液相色谱方法,在实际样品的分析中取得了满意的结果。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
JASCOGX液相色谱仪(13本JASCO公司),1580泵,1575型紫外检测器,Version 6.1色谱工作站。长春碱、长春新碱(纯度≥99% ,Sigma公司),长春质碱、文多灵(纯度>195% ,浙江海正药业股份有限公司);长春花样品采自海南省海口市;乙腈、甲醇均为色谱纯;磷酸、二乙胺为分析纯;水为二次蒸馏水。
2.2 对照品与样品配制
精确称取适量长春碱、长春新碱、长春质碱、文多灵对照品,用5 mL甲醇溶解并定溶于25 mL容量瓶,摇匀,所配制的浓度分别为0.5、0.5、0.5和1.0 g/L。取长春花全株粉末10 g,室温下分别用60、40、20 mL甲醇超声提取40、30、20 min,过滤,合并提取液,50℃减压蒸发,经0.45μm的微孔滤膜过滤,滤液定容至50 mL。所有样品保存于4℃冰箱中备用。
2.3 色谱条件
色谱柱:DiamonsilTM Cl8 ODS(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水:二乙胺=986:14,用磷酸调节pH=7.2(溶液A);甲醇:乙腈=4:1(溶液B),380 mL A和620 mL B混合作为流动相;流速为2 mL/min;进样量:10 L;柱温:23℃ ;检测波长:220 nm。
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- 2006-04-24 17:14:54
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