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- 【导读】 1 前言 依据GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法,本文提供了LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)对原料乳及乳制品中三聚氰胺的高效液相色谱(H
1 前言
依据GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法,本文提供了LC98-II型GX液相色谱仪(HPLC)对原料乳及乳制品中三聚氰胺的GX液相色谱(HPLC)检测方法。
2 范围
GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中,提出GX液相色谱法的定量限为2 mg/kg,液相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.01 mg/kg。而本文所提供的LC98-II型GX液相色谱仪(HPLC)对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。
3 GX液相色谱法
3.1 原理
试样用三***溶液-乙腈提取,经阳离子交换固相萃取柱净化后,用GX液相色谱测定,外标法定量。
3.2 试剂与材料
均按GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法的3.2操作。
3.3 仪器和设备
3.3.1 LC98-II型GX液相色谱仪(北京温分分析仪器技术开发有限公司):配有P98-II型高压输液泵及UV98-II型紫外检测器。
3.3.2 分析天平:感量为0.0001 g和0.01 g。
3.3.3 离心机:转速不低于4000 r/min。
3.3.4 超声波水浴。
3.3.5 固相萃取装置。
3.3.6 氮气吹干仪。
3.3.7 涡旋混合器。
3.3.8 具塞塑料离心管:50 mL。
3.3.9 研钵。
3.4 样品处理
均按GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法的3.4操作。
3.5 GX液相色谱测定
3.5.1 HPLC 参考条件
a) 色谱柱:C8柱,250 mm×4.6 mm,5 μm,或C18柱,250 mm×4.6 mm,5 μm。
b) 流动相:C8柱,离子对试剂缓冲液(3.2.10)-乙腈(85+15,体积比),混匀。C18柱,离子对试剂缓冲液(3.2.10)-乙腈(90+10,体积比),混匀。
c) 流速:1.0 mL/min。
d) 柱温:40℃。
e) 波长:240 nm。
f) 进样量:20 μL。
3.5.2 标准曲线的绘制
用流动相将三聚氰胺(CAS N108781)标准储备液逐级稀释得到的浓度为0.1、0.8、2、20、40、80 μg/mL 的标准工作液, 浓度由低到高进样检测,以峰面积-浓度作图,得到图A所示标准曲线。
图A 标准曲线
3.5.3 定量测定
待测样(旺旺集团提供)液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内,超过线性范围则应稀释后再进样分析。下图所示浓度为0.1mg/kg三聚氰胺待测样色谱图及数据。
3.5.4 结果计算
试样中三聚氰胺的含量由色谱数据处理软件或按式(1)计算获得:
A × c × V×1000
X= × f ……………………(1)
As × m×1000
式中:
X—— 试样中三聚氰胺的含量,单位为毫克每千克(mg/kg);
A—— 样液中三聚氰胺的峰面积;
c—— 标准溶液中三聚氰胺的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
V—— 样液*终定容体积,单位为毫升(mL);
As —— 标准溶液中三聚氰胺的峰面积;
m—— 试样的质量,单位为克(g);
f—— 稀释倍数。
3.6 空白实验
除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行。
3.7 仪器定量检测限
LC98-II型GX液相色谱仪(HPLC)的噪声指标为5X10-U/mV(50μV),按式(1)计算,可得LC98-II型GX液相色谱仪(HPLC)对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。
3.8 回收率
在添加浓度2 mg/kg~10 mg/kg浓度范围内,回收率在80%~110%之间,相对标准偏差小于10%。
3.9 允许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的**差值不得超过算术平均值的10%。
3.10 结论
本文所提供的LC98-II型GX液相色谱仪(HPLC)对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。远远优于GB/T 22388—2008规定的2mg/kg定量检测限,为GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中规定的定量限的1/40。
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- 2006-06-21 09:40:05
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