影响PCR温度控制性能的因素

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【导读】影响PCR温度控制性能的因素 PCR是分子生物学领域的关键技术。温度的准确性对于PCR仪来说很重要。影响PCR仪器温度控制性能主要有四种因素： 1.PCR仪器之间的差别对

影响 PCR 温度控制性能的因素

PCR是分子生物学领域的关键技术。温度的准确性对于PCR机非常重要。

影响PCR仪器温度控制性能的四个主要因素：

1。 PCR仪器之间的差异对实验结果的影响：

没有两个PCR仪器具有相同的温度控制。与预设温度相比，模块的温度始终较高或较低。即，同一模块的不同孔之间的温度有时不同，并且该差异可能高达几摄氏度。某些PCR仪器的温度控制性能不足的结果是，当PCR仪器模块的温度升高时，温度会过高或不足，并且无法准确达到预设的平台温度。

2。温控技术差异对实验结果的影响：

有多种方法可以将热循环仪模块的温度保持在一定温度。每种方法都有优点和缺点。另外，这些技术所应用的控制水平对于温度控制水平非常重要，并且有很大的不同。大多数PCR仪器的温度控制性能非常差。单传感器或多传感器控制机制的差异显然会导致温度不均匀。

3。仪器老化对实验结果的影响：

尽管PCR机没有任何机械或活动部件，但这并不意味着它不会磨损。电子设备的性能将随着时间的流逝而恶化，并且由于过度使用而加速。 Peltier设备的故障或磨损会在模块上引起热点或冷点。通常，由于机械磨损，模块扩展和收缩效应，PCR仪器无法识别温度控制性能的这种差异。因此，为了掌握这些条件，重要的是实时监视PCR仪器的温度控制性能。出于同样的原因，PCR仪器的温度控制性能异常通常是导致实验失败或破坏循环反应的重要原因。

4。外部因素对实验结果的影响：

不同品牌和型号的PCR仪器在温度控制性能上的差异直接影响三个温度平台的温度准确性和异质性，从而影响整个PCR反应的实验结果。另外，加热速率的差异，温度下降梯度的不均匀性，温度过低以及温度过冲也是重要的因素。 *在较差的情况下，本应为阳性的结果可能会导致阴性结果。对于实时PCR，荧光信号输出和产量/溶解曲线与温度控制直接相关，这些结果可能是惊人的。

5。实验室认证：

基于上述论点，许多实验室不得不适应某些认证。像ISO，GMP和GLP标准一样，必须证明所有实验室程序均按照标准程序执行。一些实验室只有在采用经过合作伙伴组织或专业委员会测试或批准的程序时，才能称自己为合格实验室。

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2006-09-14 09:02:53

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