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- 【导读】人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1检测试剂盒 ...
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1检测试剂盒
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1)
酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
6pg/mL - 200pg/mL
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1)水平。用纯化的人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1),再与HRP标记的TRAIL-R1抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的TRAIL-R1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品(400 pg/mL)
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。200pg/mL
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
100pg/mL
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
50pg/mL
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
25pg/mL
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
12.5pg/mL
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔diyi孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
- 2004-07-12 15:05:27
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