Percoll细胞分离液的作用

Percoll细胞分离液，适合分离细胞，亚细胞成分和大病毒(>70S)，渗透压均匀，粘度低，可调至生理离子强度和pH，分离条件温和，对细胞无毒性，可以灭菌消毒。

1作用原理
Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(<20mosm／kgH２O),粘度也很小，可形成高达1.3g／ml密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
2分离液的配置
将1份10XPBS与9份Percoll贮存液混合，制成等渗Percoll悬液，此悬液被认为是1**%Percoll悬液，其密度为1.1294g/ml。用PBS或细胞培养液稀释1**%Percoll而获得所需密度的Percoll分离液用于相应细胞的分离。若分离淋巴细胞应使用1.0777g/ml，配制时用稀释液稀释60%即可。
取比重1.077的Percoll分离液Xml与离心管中，将等倍稀释的抗凝血1/2Xml小心叠加在分离液上，经水平离心（1500rpm）后，便得四个细胞层，从而分离出淋巴细胞。表层为死细胞残片和血小板，底层为粒细胞和红细胞，中间有两层，上层富含单核细胞，下层富含淋巴细胞。
3分离液的优点
该法是纯化淋巴细胞和单核细胞的一种较好的方法，淋巴细胞纯度高达98%，单核细胞纯度可达78%。
因为Percoll具有渗透性低、不穿透细胞、粘度低、密度高和无毒害等优点，与目前常用的密度梯度离心介质，包括蔗糖（Sucrose）、血清白蛋白（Serumalbumin,ALB）、聚蔗糖（Ficoll）、氯化铯（CsCl）等相比，是目前较理想的介质。Percoll密度梯度离心已被多次成功地用于动物细胞及其细胞器的分离，纯化了包括人血液细胞、细胞、红血球细胞、白血球细胞、淋巴细胞、肝细胞等在内的十余种动物细胞。这一技术也开始用于用于分离和纯化植物原生质体、核、叶绿体和线粒体。

北京索莱宝科技有限公司备有现货产品P8370，Percoll细胞分离液密度为1.131g/ml，常卖规格为100ml，科研实验中用于分离细胞。

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