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培养基配制见文《LONZACC-5035EGM-Plus内皮细胞培养基配制》。
注意:扩增环境:37°C±1°C,5%CO2,90%±2%湿度。
1.当起始接种细胞来自冻存细胞,推荐接种密度:
细胞类型
推荐冻存后接种密度(活细胞/cm2)
培养瓶/培养板Zdi数量
HUVEC
2500
≥5xT-25flasksOR
≥1xT-75flask
HUVEC-XL
2500
≥12xT-225flasksOR
Non-HUVECEndothelial
5000
≥2xT-25flasksOR
≥1xT-75flask
备注
基于Zdi细胞数量和活力估算。更准确接种数量和活性见COA。只要能达到接种密度,也可以使用其他规格的培养板。
2.根据推荐接种密度,估算细胞培养容器的数量和有效表面积。
3.按1ml/5cm2在培养容器中添加LONZACC-5035EGM-Plus内皮细胞培养基,并且在37°C±1°C,5%CO2,90%±2%湿度条件下预孵至少30分钟。
4.打开前先用酒精或异丙醇擦拭冻存管。在无菌环境下,快速扭开盖子1/4再旋紧。37°C水浴解冻冻存管,小心不要浸没管子。随时关注管子,Z后一点冰也融化后就马上拿出管子。如果细胞解冻超过2分钟,会影响实验结果。
注意:不能用离心方法分离细胞和冻存保护液。这个动作比培养中的DMSO残留更伤害细胞。
5.使用微量移液器小心混匀细胞悬液,加入培养容器。小心混匀。放回37°C±1°C,5%CO2,90%±2%湿度培养箱。
注意:内皮细胞比其他细胞更容易贴冻存管壁。要转移全部细胞需要额外施力(moreforceful
trituration)。
LONZACC-5035EGM-Plus内皮细胞培养基细胞复苏规程由红荣微再翻译整理。
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LONZACC-5035EGM-Plus内皮细胞培养基是原LONZA内皮细胞培养基的加强版,优化用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养,扩增加速。包含2%FBS和BBE。不含外源VEGF(血管内皮生长因子)。
LONZACC-5035EGM-Plus内皮细胞培养基需要混合CC-5036和CC-4542两个组份。
产品订购信息(LONZACC-5035EGM-Plus内皮细胞培养基)
品牌
货号
产品描述
包装
LONZA
CC-5035
EGM-PlusBulletKit(CC-5036+CC-4542)
LONZACC-5035EGM-Plus内皮细胞培养基
1Kit
LONZA
CC-5036
EBM-PlusEndothelialCellBasalMedium-Plus
内皮细胞基础培养基,加强版
500mL/瓶
LONZA
CC-4542
EGM-PlusSingleQuots
内皮细胞培养基添加剂,加强版
Kit
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- 2004-08-19 09:23:06
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