几种TBS缓冲液配制方法介绍

TBS缓冲液是Tris-HCl缓冲盐溶液，为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液。属于常规pH缓冲液，常用于清洗免疫染色的组织或Western?Blot?中的蛋白印迹膜等，是常用分子生物学试剂。TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化钠、BSA、防腐剂等组成，可用于免疫金银染色中清洗组织，亦可作为封闭液的基础试剂。
Tris缓冲盐水（TBS）：10mmol/L,Tris含0.9%NaCl,用1NHC1调pH至7.4；
操作步骤(仅供参考)：
1、石蜡切片脱蜡至水。
2、胰蛋白酶消或3M尿素消化。
3、蒸馏水冲洗2次。
4、TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)振荡洗涤2次，每次5～10min。
5、进行封闭及下游其他实验。
一、TBS的配制
0.05MTBS(pH7.4)的配制：
Tris(三羟甲基胺基甲烷)12.1g
NaCl17.5g
加蒸馏水1500ml
磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4，再加蒸馏水至2000ml，即可。
如需含1%TritonX-100，则在滴加HCl前先加入20mlTritonX-100。
二、THB的配制
A液(0.2MTris)：(MW121.14)称取2.428克Tris，溶于100毫升蒸馏水中。
B液(0.1NHCl)：取37%HCl(比重1:19)0.84毫升，加入蒸馏水中，使成100毫升。
不同pH(7.19~9.10)的0.05MTHB配制：按下表，取A液25ml加B液Xml，补加蒸馏水至100ml。
B=XpHB=XpH
45.07.1925.08.14
42.57.3622.58.23
41.47.4020.08.32
40.07.5417.58.41
38.47.6015.08.51
37.57.6612.58.62
35.07.7710.08.74
32.57.877.58.92
30.07.965.09.10

27.58.05

免疫组织化学中，常用pH7.6的THB

北京索莱宝科技有限公司是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的高科技生物企业。产品主要涵盖生化试剂、分子生物学试剂、细胞培养、免疫学产品及实验耗材等。20×TBS为索莱宝自产产品，其货号为T1080。TBS缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液，主要用于免疫组化和原位杂交，酶联免疫等实验中，清洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。

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