B95-8绒猴EBV转化的白细胞

细胞名称

种属绒猴

组织来源外周血

生长状态悬浮细胞

培养条件培养基类型：RPMI1640培养基

FBS:10%

抗生素：双抗

培养条件：37℃，CO2:5%

传代方法收到细胞后，在倒置显微镜下观察细胞生长状态：

如果没长满，将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜

培养液，继续培养。

如果细胞已经长满（约80%-90%）则传代后继续培养。

贴壁细胞传代方法：

1弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2加1ml0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），让胰酶与大部分细胞接触

后放入37℃培养箱内，随时观察细胞状态变化，待细胞大部分变

圆后加完全培养基终止消化。

悬浮细胞传代方法：可以直接传代也可以离心法传代。

1直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3，

吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续

培养。

2离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内，1000rpm，

5分钟，去除上清，加新的培养液到离心管内，吹打细胞形成细胞

悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

一般没有特殊说明，细胞一般是一传二。

冻存方法70%完全培养基，20%FBS，10%DMSO，现用现配。

储存：液氮中长期保存。

注1观察细胞Z好在低倍镜下观察，便于整体估计细胞密度。

2在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落，可

离心吹打后重新种入瓶中培养。

3收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等，请在一周内与我们

联系。

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