丙酮酸脱氢酶（PDH）试剂盒的测定步骤，注意事项以及计算方法

上海信帆生物代理销售“丙酮酸脱氢酶（PDH）试剂盒"，现货供应，提供技术指导和售后服务，欢迎联系。

测定步骤

用蒸馏水于605nm处调零。

（1）取900μL工作液加入1mL玻璃比色皿，在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）中孵育5min。

（2）取出比色皿，加入50μL酶液，混匀；立即记录605nm处初始吸光值A1，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）中准确反应1min，记录605nm处1min后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。

丙酮酸脱氢酶（PDH）试剂盒注意事项

1、测定过程中所有试剂和样本在冰上放置，以免变性和失活。

2、比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。

3、Z好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。

PDH活性计算

1、组织中PDH活性计算:

（1）按样本蛋白浓度计算

单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟消耗1nmol2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。

PDH活性（U/mgprot）=反应总体积（950μL）÷样本体积（50μL）÷反应时间(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系数（21×10-3）×ΔA÷蛋白浓度(mg/mL)=905×ΔA÷蛋白浓度(mg/mL)

（2）按样本鲜重计算

单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟消耗1nmol2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。

PDH（U/g鲜重）=反应总体积（950μL）÷样本体积（50μL）÷反应时间(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系数（21×10-3）×ΔA÷样本鲜重(g/mL)=905×ΔA÷样本鲜重(g/mL)

2、细菌或培养细胞中PDH活性计算：

（1）按样本蛋白浓度计算

单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟消耗1nmol2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。

PDH活性（U/mgprot）=反应总体积（950μL）÷样本体积（50μL）÷反应时间(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系数（21×10-3）×ΔA÷蛋白浓度(mg/mL)=905×ΔA÷蛋白浓度(mg/mL)

（2）按细菌或细胞密度计算

单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟消耗1nmol2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。

PDH活性（U/104cell）=反应总体积（950μL）÷样本体积（50μL）÷反应时间(1min)÷2,6-二氯吲哚酚消光系数（21×10-3）×ΔA÷细菌或细胞密度(104cell/mL)=905×ΔA÷细菌或细胞密度(104cell/mL)

丙酮酸脱氢酶（PDH）试剂盒

仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

相关热词：

等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。