人类染色体核型分析 实验原理 实验试剂 实验设备 实验材料 实验步骤 注意事项

实验原理

核型（karyotype）一词在20世纪20年代首先由苏联学者T.A.Levzky等人提出。核型分析的发展有三项技术起了很重要的促进作用，一是1952年美籍华人细胞学家徐道觉发现的低渗处理技术，使中期细胞的染色体分散良好，便于观察；二是秋水仙素的应用便于富集中期细胞分裂相；三是植物凝集素（PHA）刺激血淋巴细胞转化、分裂，使以血培养方法观察动物及人的染色体成为可能。

核型是指染色体组在有丝分裂中期的表型，包括染色体数目、大小、形态特征等。核型分析是对染色体进行测量计算的基础上，进行分组、排队、配对并进行形态分析的过程。核型分析对于探讨人类遗传病的机制、物种亲缘关系与进化的鉴定等都有重要意义。将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征描绘下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像称为核型模式图，它代表一个物种的核型模式。

1960年，丹佛会议上，提出了人类有丝分裂染色体命名标准体制草案，为以后的所有命名方法奠定了基础。1963年，伦敦会议上，正式批准Patan提出的A、B、C、D、E、F、G七个字母表示七组染色体的分类法。1966年，芝加哥会议上，提出人类染色体组和畸变速记符号的标准命名体制。

A组（1-3号）

1号：Zda的ZY着丝粒染色体，长臂靠近着丝粒外有次缢痕。

2号：Zda的亚中着丝粒染色体。

3号：ZY着丝粒染色体，比1号小三分之一。

B组（4-5号）：为较大的亚ZY着丝粒染色体，二者不易区分。

C组（6-12号，X）：中等近ZY着丝粒染色体，彼此难区分。

6、7、9、11号：着丝粒略近ZY。

8、10、12号：偏离ZY。

9号：q有次缢痕。

X位于6、7之间。

D组（13-15号）：中等近端着丝点染色体，p常有随体。

E组（16-18号）

16号：中等ZY着丝粒染色体，q上有次缢痕。

17号：较小，近ZY着丝粒染色体。

18号：较小，近ZY着丝粒染色体，p比17号更短。

F组（19-20号）：小的ZY着丝粒染色体，彼此不易区分。

G组（21-22号，Y）：小的近端着丝粒染色体。

21、22号：p常有随体，q常呈分枝状彼此不易区分。

Y：p无随体，q通常平行靠近。

Geimsa染色液等。

摄影显微镜，显微测微尺，染色缸，吹风机等。

人外周血淋巴细胞染色体标本

1、将人外周血淋巴细胞染色体标本放入染色缸，用Geimsa染色液染色10-15分钟→在盛水塑料杯中冲涮→风干→镜检

观察细胞的标准为：

（1）细胞完整，轮廓清晰，染色体分布在同一水平面上。

（2）染色体形态和分布良好。

（3）Z好无重叠，即使有个别重叠，也要能明确辩认，以免差错。

（4）所观察的细胞处于同一有丝分裂阶段，即染色体螺旋化程度或染色体长短大致一样。

（5）在所观察的细胞周围，没有离散的单个或多个染色体存在，以免影响计数。

2、显微摄影：将制好的片子放在数码摄影显微镜下进行拍摄，以供分析。

3、核型分析

核型：一个细胞内所有染色体按一定顺序排列起来，代表着某一个体所有细胞的染色体组成，包括数目、形态、大小等，分为A、B、C、D、E、F、G等七组和一组性染色体。

组型：把核型按模式图的形式表现出来，代表一个种的染色体组成。

4、完成染色体组型分析。

显微照片分析：

染色体计数；染色体测量；

相对长度=单个染色体长度/整套单倍染色体总长×100

臂比率=q/p

着丝点指数=p/(pq)×100

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