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人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞,

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详细介绍

资源编号:BNCC338348

英文名: NK-92MI

类型: 悬浮生长

形态: 淋巴母细胞

提供形式: T25细胞培养瓶/冻存管

培养方法

培养基 MEMα+培养基(GIBCO,货号11900024,添加NaHCO3 1.5g/L,肌醇 43.2mg/L, 叶酸 8.82mg/L,β-巯基乙醇 7.8mg/L),75%;马血清, 12.5%;优质胎牛血清,12.5%。
生长条件 95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度
存储条件 90%FBS+10%DMSO 液氮

 NK-92MI 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞

悬浮,淋巴母细胞样

编号: 338348

培养:37℃,5%CO2 专用培养液

产品形式: 2mL 冻存管 × 2支、或 离心管 15mL

安全等级:二级,安全柜操作

收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;离心管 15mL,收货后先离心管原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏 时每管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。

培养条件:37℃,5%CO2,MEMα+0.2mM 肌醇+0.1mMβ-巯基乙醇 +0.02mM 叶酸+12.5% HS+12.5% FBS。

复苏步骤:

①新制 100mm平皿 1个,含 12mL 上述培养液;

②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;

③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;

④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,7-10 天长满。

传代:将培养好的悬浮细胞轻轻吹打均匀,分配至 1~2 个新鲜培养液皿中,轻轻摇匀后放入培养箱培养;

冻存:将悬浮细胞转移至离心管中,(110g,3min)离心,离心完成后用 3mL 冻存液(95%完全培养基+5%DMSO)重悬细胞,吹打均匀, 分为 3支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。

复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:

项目 质量标准 复苏记录
复活性 240h长满 80% 接种量 20%,过夜 18h后观察悬浮至 30%,220h后密度达 80%
细胞形态 悬浮,淋巴母细胞样 悬浮,淋巴母细胞样,圆形,大多数聚团生长,密度依赖性强
附图
结论 复活性好,且细胞形态无异常,合格

质检员/日期: 丁保敏 2021.05.13 审核员签字:朱玥

关于此细胞株更多信息可在 BNCC官网查询:www.bncc.org.cn.

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