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重组片段抗体定制服务
- 品牌:天津泰克生物
- 型号: 重组片段抗体定制服务
- 产地:武清区
- 供应商报价: 面议
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泰克生物科技(天津)有限公司
更新时间:2024-07-16 17:05:10
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企业性质生产商
入驻年限第3年
营业执照已审核
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- 详细介绍
抗体/抗体片段抗原产生特异性和高效结合性,在生化和诊断等领域发挥不可替代的作用。传统生产单克隆抗体的杂交瘤技术,由于其自身研发周期比较长,生产的成本相对较高,已经成为大规模、快速生产抗体/抗体片段的瓶颈。近年来,随着基因重组和生物工程技术的不断进步,高通量筛选和大规模生产抗体/抗体片段成为现实。
抗原结合片段 (Fab) 是抗体上与抗原结合的区域。 它包含每条重链和轻链的一个恒定区和一个可变区。 只有重链和轻链的可变区融合在一起形成单链可变片段(scFv),其大小只有Fab片段的一半,但保留了原有的特异性。另一种小抗体片段,单域抗体,又称域抗体、VHH、VNAR或sdAb,是一种由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段,缺少常规的轻链和重链的CH结构域。
泰克生物是一家专业的CRO服务提供商,能为我们的客户提供高质量的重组抗体表达服务,如scfv抗体片段、fab抗体片段、sdAb单域抗体、重链抗体等重组抗体构建和表达服务。另外,泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心,能够为各类工业客户提供批量的重组抗体生产服务。
█ 抗体片段特性
抗体类型
组分
分子量(kDa)
化合价
半衰期(h)
Fab
VH+CH1+VL+CL
(轻重链利用二硫键连接)
50-55
单体
12-20
scFv
VH+VL
30
单体
2-4
sdAb
VHH
15
单体
0.5
Fc融合抗体
(抗体+CH2+CH3)*2
/
二聚体
/
di-scFv
scFv*2
60
二聚体
4-8
█ 抗体片段表达系统常用宿主
表达系统
菌株/细胞
特点
E.coli
BL21(DE3)
Ion-ompT,有效防止重组蛋白在胞内被水解
Rosetta(DE3)菌株含有pRARE质粒,能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA稀有密码子的tRNA,能够提供更加“通用”的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平,该质粒具有氯霉素抗性。Rosetta
哺乳动物细胞
CHO-S
是实验室常用的细胞系,作为贴壁和悬浮培养生长良好,生产率高,是大规模培养和GMP程序的理想选择;可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药,显示出生物相容性和药物活性;适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件,并具有更好的稳定性和安全性。
CHO-K1
Freestyle 293F
是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系,可以高效表达蛋白。
Expi 293F
具有高度可转染行,展示出较高的蛋白表达水平,相比标准的悬浮适应293细胞,表现出更快速的细胞生长和更高的培养存活率。
█ 抗体片段高表达策略
优化方式
特性
融合抗体
Fab 基因表达时,5'端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因,可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达,形成完整的立体折叠。Fab片段保持了亲本抗体的抗原结合特异性和生物学活性。Fd基因片段和L链基因可以分别构建在两个载体上,然后共转染细胞,也可以构建在一个载体上转染细胞进行表达。
抗体序列本身的修饰
经定点突变可以改变抗体在某些关键位点的氨基酸,从而优化其稳定性,增强与抗原的亲和性,提高表达产量。
表达系统的选择
应考虑的因素有:实验设备、需表达抗体毒性、所需营养物、是否需要抗体高产率、抗体纯化工艺、生产成本、调控元件、生物安全方面等。
密码子优化
天然抗体/scFv来源于真核生物,其密码子很可能不为E.coli所偏好,使用偏好密码子能提高细胞对环境及抗体的适应性,减少重组抗体的错误折叠率。
条件优化
需要考虑的因素包括温度、培养基配比、pH、培养时间及诱导条件等。
█ 抗体表达服务内容
实验内容
交付
周期
基因合成&载体构建
1. 重组抗体
2. 表达载体
3. 克隆菌株
4. 实验报告
6-8周
质粒抽提
细胞转染&表达抗体
抗体纯化(SDS-PAGE)
█ 泰克可提供的服务
片段抗体构建和生产服务
片段抗体包括Fab抗体、scFv和VHH抗体(驼源纳米抗体)等。客户可直接提供Fab、scFv或VHH序列,交由泰克生物进行重组表达并获得高纯度产品。如客户仅有靶抗原信息,则可委托泰克生物进行动物免疫并筛选scFv、VHH等抗体。
重组抗体293F/CHO细胞表达服务
全套Gibco无血清哺乳细胞培养,适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求,如糖基化修饰,磷酸化修饰等。为客户提供的全套服务满足GMP-like体系,包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定,动物源成分的质控,标准化细胞培养与转化操作流程,全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。
█ 服务优势
✔ 详细的实验设计和论证:包含稀有密码子分析,抗体序列分析,表达系统的选择,表达载体构建方案,抗体修饰等
✔ 多种标记抗体表达:His标签融合表达,同位素标记表达、生物素标记表达
✔ 多个种属的重组抗体制备:包括人源,鼠源,兔源,羊源,犬源,骆驼源,羊驼源,牛源等
✔ 抗体修饰控制:糖基化修饰和磷酸化修饰多寡控制
✔ 多重表达模式:稳定表达和瞬时表达
✔ 配套的哺乳体系高表达载体和各种规格的放大体系
✔ 低内毒素水平:LAL检测法<0.1EU/ug
✔ 完整的文件追溯体系,保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯
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