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土霉素ELISA检测试剂盒

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详细介绍

深圳艾瑞斯生产的土霉素ELISA检测试剂盒原理及用途

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的土霉素药物(Oxytetracycline,OTC),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的土霉素药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗土霉素药物抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含土霉素药物含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中土霉素药物的残留量。

土霉素ELISA检测试剂盒技术指标

2.1 试剂盒灵敏度:0.05ppb(ng/ml)

2.2 反应模式:37℃,30min~30min~15min

2.3 检测下限:

组织、肝脏、鸡蛋………………0.4ppb

蜂蜜………………………………2ppb

尿样………………………………0.5ppb

2.4 交叉反应率:

四环素………………………………100%

土霉素………………………………100%

金霉素………………………………16.7%

强li霉素……………………………4.2%

2.5 样本回收率:

组织、肝脏、鸡蛋…………85±20%

蜂蜜…………………………75±20%

尿样…………………………80±20%

3 试剂盒组成

酶标板………………………96孔

高浓度标准品溶液1瓶:(1ml/瓶)1.0ppm(高标准液有挥发性,需注意密封)

标准品溶液0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb(均为空瓶子,现配现用)。

酶标记物(红盖)…………………11ml

抗体工作液(蓝盖)………………5.5ml

底物液A(白盖)……………………6ml

底物液B(黑盖)……………………6ml

终止液(黄盖)………………………6ml

20×浓缩洗涤液(白盖)……………40ml

5×复溶液(黄盖)…………………50ml

说明书………………………………1份

​酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。

实验开始前需配制标准品应用液;低浓度的标准品不稳定,需现配现用。

在0ppb的瓶中加复溶液3ml,0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb的瓶中分别加复溶液2ml,4.05ppb的瓶中加复溶液3ml。

标准液6:取1.0ppm高浓度标准品溶液12ul加入装有3ml 复溶液4.05ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为4.05ppb。

标准液5:取1ml标准液6加入装有2ml 复溶液1.35ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为1.35ppb。

标准液4:取1ml标准液5加入装有2ml 复溶液0.45ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为0.45ppb。

标准液3:取1ml标准液4加入装有2ml 复溶液0.15ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为0.15ppb。

标准液2:取1ml标准液3加入装有2ml 复溶液0.05ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为0.05ppb。

标准液1:直接使用复溶液,浓度即为0ppb。

1 编    号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2 加样反应:加标准品应用液或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗体工作液50µl/孔,轻轻振荡5秒混匀,37℃避光反应30分钟。

3 洗    涤:将孔内液体甩干,用工作洗涤液350µl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。

4 加酶反应:加酶标记物100µl/孔,37℃避光反应30分钟。

5 洗    涤:同上

6 显    色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,轻轻振荡5秒混匀,37℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。

7 终    止:加终止液50µl/孔,轻轻振荡混匀,终止反应。

8 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成

主要用途
土霉素ELISA检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被土霉素药物抗原,样本残留的土霉素药物和微孔条上预包被的抗原竞争抗土霉素药物抗体(抗试剂),加入酶标二抗(酶标物),经TMB底物显色,样本吸光度值与其残留物土霉素药物呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中土霉素药物的含量。
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