诺氟沙星酶联免疫检测试剂盒

诺氟沙星酶联免疫检测试剂盒原理及用途

诺氟沙星检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测蜂蜜、动物组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）、牛奶、奶粉和鸡蛋等样本中的诺氟沙星（Norfloxacin），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的诺氟沙星和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗诺氟沙星抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含诺氟沙星含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中诺氟沙星的残留量。

适用范围

诺氟沙星检测试剂盒可定性、定量检测动物组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）、牛奶、奶粉、鸡蛋、蜂蜜等样本中诺氟沙星的残留量。

诺氟沙星酶联免疫检测试剂盒技术指标

2.1 试剂盒灵敏度：0.1ppb(ng/ml)

2.2 反应模式：25℃，45min～15min。

2.3 检测下限：

组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）：0.3ppb  蜂蜜 ：0.4ppb  牛奶 ：3ppb  奶粉 ：6ppb  鸡蛋 ：3ppb

2.4 交叉反应率：

诺氟沙星：100% 左氧氟沙星：10%  环丙沙星：5% 恩诺沙星：3% 沙拉沙星：2% 其它沙星类药物交叉反应率均小于0.1%

2.5 样本回收率：

组织：85%±15%  蜂蜜：85%±15%  牛奶：85%±15%  奶粉：85%±15%  鸡蛋：85%±15%

诺氟沙星检测试剂盒组成

酶标板、标准液（6个）、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩洗涤液、复溶液

4 需要的器材和试剂

4.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

4.3 试剂：无水乙腈、正己烷、浓HCl

、贮藏条件及保存期

储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，不要冷冻。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

样本前处理

1 样本处理前须知：

实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

2 配液：

配液1：0.15M盐酸溶液

取5ml浓盐酸，加入去离子水混匀，定容至400ml。

配液2：样本提取液

量取10ml 0.15M盐酸溶液（配液1）加入到90ml无水乙腈中混合均匀。

配液3：复溶液

将5×复溶液用去离子水5倍稀释（1份复溶液加4份去离子水），用于样本的复溶，复溶液在4℃环境可保存一个月。

配液4:工作洗涤液

将浓缩洗涤液20倍稀释(1份洗涤液加19份去离子水)。

样本前处理步骤：

动物组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）处理方法

1）称2.0±0.05g 均质过的组织样本于50ml离心管中；

2）加入8ml样本提取液（配液2），振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟；

3）取2ml清澈上层有机相至洁净干燥的10ml玻璃试管中，50-60℃水浴氮气吹干；

4）加入1ml正己烷，振荡2分钟，再加1ml复溶液（配液3），振荡30秒，室温4000转/分离心5分钟；

5）去除上层正己烷，取下层水相50µl液体用于分析