磺胺多残留ELISA检测试剂盒

一、磺胺多残留ELISA检测试剂盒概要

磺胺类药物（SAs）是应用广泛的抗素，对畜禽疾病控制和治起到重要作用。但由于磺胺类药物存在严重副作用，人体中长期存在磺胺类药物会导致许多细菌对磺胺类药物产生耐药性，且有潜在的致癌性。我国农业部第235号文件规定其残留xian量为100ug/kg,由于高效液相色谱等仪器分析方法样本前处理及测定操作繁琐和费用高，推广使用受到限制。

二、原理

磺胺多残留检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测组织、血清、蜂蜜、牛奶等样本中的磺胺类药物（SulfonamideS，SAS），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的磺胺类药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗磺胺类药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含磺胺类药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中磺胺类药物的残留量。

三、适用范围

磺胺多残留检测试剂盒可定性、定量检测动物组织（肌肉/鱼/虾）、鸡蛋、饲料等样品中磺胺甲唑（SMZ）、磺胺间二甲氧啶（SDM）磺胺间甲氧啶（SMM）磺胺喹啉（SQX）、磺胺啶（SD/SDZ）、磺胺二甲基啶（SM2） 等药物的残留量。

四、磺胺多残留ELISA检测试剂盒技术指标

1 试剂盒灵敏度：0.5ppb(ng/ml)

2 反应模式：25℃，45min～15min。

3 检测下限：

组织（高检测限方法）：0.5ppb   组织（低检测限方法）：2.5ppb    牛奶：10ppb  血清、尿液：2ppb          蜂蜜：0.5ppb

4 样本回收率：

组织、蜂蜜：95±25% 尿样、牛奶、血清：85±25%

五、磺胺多残留快速检测试剂盒组成

酶标板、标准液（6个）、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩洗涤液、复溶液

六、贮藏条件及保存期

储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，不要冷冻。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

1 编    号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2 加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应45分钟。

3 洗    涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350µl l工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，一次拍干（用吸水纸拍干，拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

4 显    色：每孔加入底物液A 50µl，再加底物液B 50µl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

5 终    止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。

6 测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。