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pcr的产物可以不可以直接拿来做模板再进行pcr

两人之圣经    2009-08-15    PCR纯化    浏览 1338 次

精彩问答
z20112012321 发布日期:2009-08-17
一般不建议这样做。除非你做巢式PCR。

以PCR产物作为模板,首先必须保证你的PCR产物经过纯化,成分单一,因此,无论怎样,diyi轮PCR产物都要进行纯化,并且必须使用高保真酶以减少碱基错配的可能。这样才能以diyi轮PCR产物为模板进行第二轮扩增。(用于巢式pcr).
全部评论
西泽狗劂 发布日期:2009-08-16
不行
DNA必须经过处理才能做模板,好像是加糖基……
儿童婊沾 发布日期:2009-08-16
必须进行纯化,diyi次PCR之后,进行电泳,用小刀将目的条带切下,做一个叫回收,这时你得到的DNA才是不含有有其它杂质片段的,可以作为模板。pcr反应有许多原因会造成反应的非特异性比方说引物的浓度过高使得引物与模版的非特异性结合等,就会产生非目的性的基因片段。必须电泳清除掉非目的性片段。
shoppingoh 发布日期:2009-08-16
这个主要是要看你第二次的PCR的引物和你diyi次的是否一样
如果一样的话 理论上可以 但是效果很不好 可以保证做不出来
如果不一样 而且第二轮PCR的引物是在你的diyi轮PCR产物内的
是可以做出来的 而且不同纯化 这个叫NESTED PCR
susu5868 发布日期:2009-08-17
一般都要稀释,否则模版浓度过高,会稀释引物,有很多非特异扩增。
至于纯化,要看扩增结果是否特异。如果只有一条带,就不用纯化;如果有杂带,就需要纯化。
comlxq 发布日期:2009-08-16
当然~~可以啦

其实,PCR的产物,和你的原先的模版是一样的东西——复制品罢了
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