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如何得到高产量的RNA粗制品??

梦里南谣    2011-04-20    抽滤瓶    浏览 1914 次

要详细点的。。

精彩问答
皮蛋泡泡粥free 发布日期:2011-04-21
【实验原理】
酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶于碱性溶液,在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀,由此即得到RNA的粗制品。
【实验材料和主要仪器、试剂】
1.实验材料:
酵母粉 (或酵母片)
2.实验仪器:
研钵、150mL锥形瓶、恒温水浴锅、布氏漏斗
及抽滤瓶、离心机、漏斗、分光光度计。
3.实验试剂:
0.04mol/LNaOH溶液、95%乙醇、酸性乙醇
溶液、1.5mol/L硫酸溶液 、浓氨水、
0.1mol/L硝酸银溶液 、氯化铁浓盐酸溶
液、苔黑酚乙醇溶液、钼酸铵试剂(将2g
钼酸铵溶解在100ml10%硫酸中)、标准
RNA母液、标准RNA溶液、样品溶液、地衣
酚-铜离子试剂。
【操作】
将5g酵母悬浮30mL0.04mol/L氢氧化钠溶液中,并在乳钵中研磨均匀。将悬浮液转移至100毫升锥形瓶中。在沸水浴上加热30分钟后,冷却。离心(3000r/min)15分钟,将上清液缓缓倾入15 mL酸性乙醇溶液中。注意要一边搅拌一边缓缓倾入。待核糖核酸沉淀完全后,离心(3000r/min)3分钟。弃去清液。用95%乙醇洗涤沉淀两次,洗涤沉淀一次后,再用将沉淀转移至布氏漏斗中抽滤。沉淀可在空气中干燥。
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