DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾的原因是什么

齐志伟772 2015-04-15 核酸电泳浏览 1507 次

精彩问答

sirenzhan591 发布日期：2017-09-01

原因有以下：
1、可以考虑是不是样品不纯，目的产物与杂带相差不大，所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker，marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液，加2微升溴酚蓝便可，注意上样浓度；
3、可能是原液浓度太大造成的；
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer，文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
7、 DNA上样量过多，可以减少凝胶中DNA上样量。
8、所用电泳条件不合适，可以将电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃，巨大DNA链，温度应＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
9、 DNA样含盐过高，可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
10、有蛋白污染，可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。
11、 DNA变性，电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

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被采纳

忘记那些人bb 发布日期：2015-04-16

电泳出现拖尾现象，英文成为smear，就是弥散.其原因，主要从以下两个方面考虑：
1、PCR产物自身原因：
往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物过多.
对策：①减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量，减少引物的用量，减少循环次数，提高退火温度.
2、电泳体系的问题：
（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染，建议更换缓冲液.（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样.（3）电压太高.（4）适当把你的胶的浓度加大.（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照.
以前有挺多人问过这个问题了借用下以往问题的Z佳答案

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