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为什么电泳后要转膜? 直接染色或荧光标记检测不可以吗?

nh327739032    2011-10-18    荧光探针    浏览 659 次

我的意思是是否可以直接加带荧光探针的抗体在胶上,或者直接用抗原+抗体+探针的复合物跑胶。大家给的意见都有帮助。不过因为只能选一个答案,而我又是做WB的,所以hunyaa911的比较切合... 我的意思是是否可以直接加带荧光探针的抗体在胶上,或者直接用抗原+抗体+探针的复合物跑胶。

大家给的意见都有帮助。不过因为只能选一个答案,而我又是做WB的,所以hunyaa911的比较切合我的情况。多谢大家。为表示感谢,把对我有帮助的答案都贴在下面。
wsh349 | 二级
以southern杂交来说,酶切电泳后需要将DNA转移到固定介质上,加入探针进行杂交,然后经过显色才能现出特异条带。如果直接染色那么显示出的只能是弥散的条带,而没有目的条带
2011-10-19 14:27 热心网友
当然可以直接染,比如用考马斯亮蓝,银染。不过这种染色没有特异性。
能用抗体直接加在胶上染么?胶又厚又脆,哪里有nc膜或者pvdf膜好弄呢?
2011-10-19 14:48 hunyaa911 | 八级
抗体需要孵育 直接在胶上的话蛋白早就扩散没了 而且胶各种不方便 容易破碎啥的 当然转到膜上方便啊

精彩问答
wo叫大姐姐i 发布日期:2011-10-19
抗体需要孵育 直接在胶上的话蛋白早就扩散没了 而且胶各种不方便 容易破碎啥的 当然转到膜上方便啊
全部评论
美丽的公主5368 发布日期:2011-10-19
当然可以直接染,比如用考马斯亮蓝,银染。不过这种染色没有特异性。
能用抗体直接加在胶上染么?胶又厚又脆,哪里有nc膜或者pvdf膜好弄呢?
zswxy33 发布日期:2011-10-19
以southern杂交来说,酶切电泳后需要将DNA转移到固定介质上,加入探针进行杂交,然后经过显色才能现出特异条带。如果直接染色那么显示出的只能是弥散的条带,而没有目的条带
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