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Axygen mini-prepare 质粒提取试剂盒中的Buffer S1,S2,S3,W1,W2都是什么成分

徐南这    2018-04-05    质粒提取    浏览 1043 次

精彩问答
庞小芹 发布日期:2018-04-06
这是人家公司保密的东西,要内部人才会知道。不过根据其原理,应该可以推测出各溶液大致的组分吧(当然具体的浓度有些公司会优化,而略不同于分子克隆)。
S1:溶菌的buffer,无外乎提供缓冲条件的25mM tris-cl,螯合二价离子的10mM EDTA(YZ降解核酸的酶活),更利于细菌悬浮的50mM葡萄糖;
S2: 0.2 N NaOH & 1% SDS(裂解细胞,变性蛋白和DNA);
S3:5M 醋酸钾(结合SDS,沉淀蛋白和基因组DNA),2M冰醋酸(中和S2的碱,使质粒DNA复性);
W1:去蛋白液(一般是含异丙醇(可能50%)和sds等去污剂的水溶液)
W2:70-75%乙醇,洗涤除盐(可能含有一些螯合盐的螯合剂?)
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