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结合碱裂解法提取质粒,配置溶液1为什么使用ph酸度计

nunu_nuli    2016-05-23    质粒提取    浏览 378 次

精彩问答
wangpeiaili100 发布日期:2017-07-02
若无特殊考虑,Rnase加入到Buffer 1,并低温保存是Z好的。在Z终收获的质粒中加入,会带来RNAase的污染,并会有寡核苷酸的带入,并可能降低你质粒的得率,你需要考虑是否对你后续实验有影响(是否还要去RNAase?)。
另一种情况,就是你忘记王Buffer1中提前加入RNAase,这时,干脆就别加了,反正质粒都提完了,何必又带来RNAase的污染?RNA不甚稳定,一般在破细胞时,大多会降解的。
被采纳
易心格格 发布日期:2016-05-24
若无特殊考虑,Rnase加入到Buffer 1,并低温保存是Z好的。在Z终收获的质粒中加入,会带来RNAase的污染,并会有寡核苷酸的带入,并可能降低你质粒的得率,你需要考虑是否对你后续实验有影响(是否还要去RNAase?)。
另一种情况,就是你忘记王Buffer1中提前加入RNAase,这时,干脆就别加了,反正质粒都提完了,何必又带来RNAase的污染?RNA不甚稳定,一般在破细胞时,大多会降解的。

想保持质粒完整,那就是在分别加Buffer2、buffer3时,避免剧烈混合,温柔混合。这是关键!

个人见解,供您参考,祝愉快!
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要书翠 发布日期:2017-07-02
需要控制pH
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