转入大肠杆菌质粒还可以提取转入农杆菌？为什么？

skyu132 2011-10-24 质粒提取浏览 639 次

精彩问答

大大拿0 发布日期：2011-10-25

首先，你的质粒必须是穿梭质粒，否则不可能转的。

如果是穿梭质粒的话，提取出来直接转化感受态的农杆菌就好。

步骤：
农杆菌感受态细胞的制备
1.挑取少许农杆菌，接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中，28℃、200r/mim培养过夜。
2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养，直至OD800 为0.5左右。
3.将培养物置冰浴中30min，4℃、5000r/min、离心5min，弃去上清液。
4.用10ml冷的0.1mol/L NaCl悬浮菌液。
5.4℃、5000r/min，离心5min，弃去上清液。
6.用1ml冷的CaCl2 (20mmol/L)悬浮，分装成50μl／管，液氮中冷冻后至-80℃保存

不是穿梭载体。

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要书翠发布日期：2011-10-29

都是的啊

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杨成功3 发布日期：2011-10-25

都是细菌，为什么不能。质粒又不那么认菌的

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