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如何确定混合样品中的氨基酸组分

ifmzd42133    2015-10-23    氨基酸分析仪    浏览 911 次

精彩问答
lyebganr71 发布日期:2015-10-24
 如何确定混合样品中的氨基酸组分答:首先,氨基酸组成分析工作量不小,而且要求操作者有较高的操作水平,如果你只是为了检测一下的话,不如花点钱寄出去测测,自己做有时徒劳无功啊。液相色谱是可以做,但是检测机构都有专门的氨基酸分析仪(虽然核心也是一个HPLC)。如果楼主坚持自己做,那么我说说以前我所了解的一些东西,也就是一个大概,因为也过去两年多了。希望能帮到你。氨基酸组成分析的实验过程(色谱法)主要分为:水解、衍生和色谱三步。先说说水解,主要就是酸法和酶法,酸法会对某些氨基酸有破坏作用,而酶法虽然温和,但有时水解不完全。还是采用酸法的多一些。酸法时可以加入2%的苯酚作为保护剂,防止Met和Cys被氧化;对于Ser可以加入秋季乙醇保护,具体浓度记不清了。对了,CysZ好要保护起来,否则定量不准,保护的方法可以烷基化,具体的过程可以查查文献。整个过程Z好能抽真空并充氮。衍生化的方法有很多,用得多的有OPA(用荧光检测器)和PTC(用254nm紫外检测)两种,都是柱前衍生,就是在上HPLC前进行衍生化。这个楼主可以查查文献,俺记不太清具体的操作了。基本上那些检测机构也就是这两种衍生用得多。
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