将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱和,并且立即用同样的混合溶剂展开至约15cm。用冷空气流干燥薄层板,置于碘蒸气中显色直... 将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱和,并且立即用同样的混合溶剂展开至约15cm。用冷空气流干燥薄层板,置于碘蒸气中显色直至得到对照液的主斑点,在254nm处用紫外光检测。
以上是原文省去了供试液等的制备及Z后结果的判断。
我有以下疑问望各位前辈给予指点:
1、“并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟”,这个15分钟是怎么样放置的?层析室中是要放展开剂吗?如果是的话,那不是已经开始展开了吗,何必下面又来句同样的混合溶剂展开15cm呢?这点到底应该怎么操作呢?我以前做其它样品的时候是点完样之后直接展开15cm的,没有要求放置15分钟。
2、“层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱和”,如果按展开剂8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的话,展开样品的时候,岂不是已经超过点样点了吗?展开剂不是不能够超过点样的位置吗?我是否可以把比例放小?既然能够放小为何又说8:8:84呢,直接说2:2:21呢?
3、我在没有放置15分钟和展开剂按2:2:21得时候,分离效果不是很好,分不开。
谢谢各位,分都给你们了!!!
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