VC具有抗坏血病的效应，所以又称抗坏血酸(Ascorbicacid).它是人体不可缺少的一种重要营养物质，常存在于新鲜的蔬菜和水果中.由于抗坏血酸参与体内一系列代谢和反应，能促进胶原蛋白和粘多糖的合成，增加微血管的致密性，降低其通透性及脆性，增加机体抵抗力.缺乏时，引起造血机能障碍、贫血、微血管壁通透性增加，脆性增强和血管容易破裂出血，严重时肌肉、内脏出血死亡，这些症状在临床上通常称为坏血病.因此抗坏血酸不仅是人体所必须的由外界提供的营养物质，同时也是维持正常生命过程所必需的一类有机物.人正常每天Z低需要量为75mg，长期缺乏抗坏血酸会导致某种营养不良症状及相应的疾病，所以，VC对维持人体健康十分重要.对部分食品中的营养成分———抗坏血酸的含量做一些测定，为指导人们合理膳食，正确补充营养素有一定意义.目前测定抗坏血酸的方法有2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼分光光度法[1]、荧光分光光度法、近红外分光光度法[2]、电位滴定法[3-4]、钼蓝比色法[5]、褪色光度法[6]、GX液相色谱法[7]等.不同方法各有其长处，但也有一定的局限性.如2，6-二氯酚滴定法及2，4-二硝基苯肼光度法操作复杂，测试条件较为严格.2，4-二硝基苯肼光度法完成一次样品分析需数小时，不能快速测定[8].利用VC分子中的烯二醇基将Fe3+定量还原成成F2+e与2，2’-联吡啶(2，2-bipyridine)进行显色反应.并利用2，2’-bipy-Fe2+-VC显色体系在本文研究的Z佳测定条件下用分光光度法间接测定VC的含量，由于剩余Fe3+的也能与2，2’-联毗啶显色，可用NaF将其掩蔽.此法简便、快速，结果令人满意，为食品和药片中VC含量的测定提供了方法.1试验部分1.1主要仪器和试剂722型光栅分光光度计(山东高密分析仪器厂);电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);六孔数显水浴锅(金坛市环保仪器厂);捣碎机.0·0001250mol/L维生素C标准溶液:准确称取维生素C(分析纯)0·01101g，加入适量pH3三溶液溶解，定量转移到500mL的棕色容量瓶中，用pH3三溶液稀释至刻度，暗处放置.Fe3+标准溶液:0·001mol/L，称取硫酸铁铵0·24g，用1mol/L，的硫酸溶解，用水稀释到500mL.2，2’-联吡啶:0·004mol/L，称取固体物质用少量的无水乙醇溶解，并用水稀释到250mL.1mol/L的NaF标准溶液.1·2试验方法用移液管移取10mLFe3+标准溶液和一定量的VC标准溶液于50mL比色管中.加入10mLpH3三溶液，然后加入一定量的2，2’-联吡啶溶液和1mol/LNaF溶液1·00mL，用水稀释至50mL、摇匀.室温条件下静置10min后置1cm比色皿中，在分光光度计上以试剂空白为参比，于520nm波长处测定其吸光度.2结果与讨论2.1测量波长的选择按试验方法以试剂为空白，将显色后的溶液在400~600nm区间内绘制吸收曲线，如图1所示.结果表明Z大吸收波长为520nm，实验选用520nm为测定波长.2.2显色剂加入量试验结果表明，0·004mol/L2，2’-联吡啶用量在8·0~10·0mL范围内，吸光度达到Z大且稳定.本法用量为9mL.2.3反应时间与温度的影响分别考察了反应时间与反应温度对体系吸光度的影响，结果表明，室温度时定容5~10min之内即可显色完全，且显色在100min内相当稳定.本文选择在室温下反应10min.2·4离于对试剂的选择当CTMAB加入5mL时对2，2’-bipy-Fe2+-VC形成络合物的吸光度和吸收波长无显著影响，而加入三乙醇胺则可使显色体系的吸光度增大.2.5掩蔽剂及用量选择在试验中发现，被抗坏血酸还原后剩余的Fe3+也可以与2，2’-联吡啶生成有色配合物，并在光还原作用下还原为Fe2+与2，2’-联吡啶的配合物，因此需要用掩蔽剂来掩蔽剩余的Fe3+，本实验选用1mol/LNaF溶液作为掩蔽剂，进一步研究表明，0·25mL以上的1mol/LNaF溶液即能达到掩蔽作用.故本文选用1mL的1mol/LNaF溶液作为掩蔽剂.2.6标准曲线制备按试验方法对标准系列进行显色测定，结果表明:VC质量浓度在0·088~7·0mg/L范围内符合比尔113第3期刘宇奇，杨睿，杨泳:光度法测定药品和食物中的微量VC定律;回归方程为:A=0·00325+23149·45503C(mol/L)，相关系数为0.99991;表观摩尔吸光系数ε=2·40×104L·mol-1·cm-1.2·7干扰离子的影响当相对误差控制在±5%以内，对1·0mg/L的抗坏血酸进行测定时，下列倍数的物质不干扰:Na+，Cl-，K+，NO3-，Zn2+(1000倍)，Mg2-，SO42+，Al3+(500倍)，I′(100倍)，VitaminB1，VitaminE(100倍)，常见离子中Ca2+(1000倍)，Ba2+对抗坏血酸的测定产生干扰，但在样品中Ba2+与Ca2+的含量一般比较低.通常不需要分离处理，可以直接测定.1mL的1mol/LNaF可掩蔽Fe3+，体系选择性较好.2.8样品分析样品制备和测定分析1)VC药片.分别将市售VC白片和VC黄片各一瓶倒入玻璃研钵中研细，充分混匀后，准确称取VC白片0.019841g和黄片0.01386g置于2个100mL的容量瓶中，用pH3三溶液浸取并定容.充分摇动使其粉末分散约1~2min后，立即用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，精密移取过滤液1.50mL于50mL比色管中定容，按试验方法进行测定，结果如表1.表1药片中维生素C含量测定结果(n=6)Tab.1ThedeterminationresultsofcontentofvitaminCinmedicaltablet(n=6)样品本法测定值g/100g加入量/μg回收率/%RSD/%VC白片68·0290102·80·701VC黄片57·8989103·70·325表2食物中维生素C含量测定结果(n=6)Tab.2ThedeterminationresultsofcontentofvitaminCinfoods(n=6)样品本法测定值加入量/μg回收率/%RSD/%弥猴桃0·238g/100g0·20098·20·541黄瓜10·03mg/100g0·200104·91·41鲜橙多58·50mg/100mL0·20096·31·082)食物样品.称取去皮猕猴桃30·8539g和黄瓜25·4258g浸在一定量的pH3三溶液中，用捣碎机捣碎混匀并过滤.取过滤后的猕猴桃果汁置于500mL的容量瓶中、黄瓜过滤液置于100mL的容量瓶中，并用pH3三溶液稀释至刻度.充分摇动1~2min，立即用干燥滤纸滤去初滤液，精密分别移取猕猴桃过滤液1·00mL和黄瓜过滤液5·00mL于50mL比色管中定容，按试验方法进行测定，结果如表2.3)饮料.移取鲜橙多10·00mL在一定量的pH3三溶液中，置于100mL的容量瓶中，并用pH3三溶液稀释至刻度.充分摇动1~2min，精密移取过滤液2·50mL于50mL比色管中定容，按试验方法进行测定，结果如表2.3结语1)从表2中看出，水果中猕猴桃的维生素C含量较为丰富，在日常生活中应多食用这类水果，补充身体所需营养素.2)从表1和表2中方法的精密度、回收率以及标准曲线的线性关系来看，用分光光度法测定抗坏血酸是可行的.但是由于抗坏血酸本身性质不稳定，容易降解，因此在进行样品处理时应注意尽快将样品捣碎浸取在缓冲溶液中.3)水果中含有的铁都是以有机物形式存在的，不与2，2’-联吡啶直接络合，则不影响测定结果.水果中的VC在空气中极易被氧化，样品处理时必须用保护剂防止VC被氧化.保护剂不能用草酸，因草酸具有还原性，本法用三缓冲溶液作保护剂.参考文献:[1]闫树刚，韩涛.果蔬及其制品中维生素C测定方法评价[J].农学通报，2002，18(4):110-112.114昆明理工大学学报(理工版)第33卷[2]杨婷，逯家辉，张大海，等.菲林B近红外分光光度法测定维生素C[J].分析化学，2005，33(11):1593-1595.[3]陈秋丽，甘振威，张娅捷，等.电位滴定法测定深色蔬菜和水果中的维生素C[J].吉林大学学报:医学版，2004，30(5):821-822.[4]陈志慧.荔枝保鲜过程中维生素C的快速电位滴定[J].理化检验(化学分册)，2006，42(8):664-665.[5]李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学，2000，21(8):42-45.[6]孙德坤，许月明，吴定.褪色光度法测定果蔬中VC的含量C[J].食品工业科技:2003，24(5):93-95.[7]胡志群，王惠聪，胡桂兵.GX液相色谱测定荔枝果肉中的糖、酸和维生素C[J].果树学报，2005，22(5):582.[8]奚长生.磷钼蓝分光光度法测定维生素C[J].光谱学与光谱分析，2001，21(5):723-725.(上接第103页)该综合方程的R2更接近1;F值临界值为6·42，而该方程的F值为30·59;P值减小，表明该回归方程具有更好的统计意义.方程说明ΔE(H-L)，Q(C5)和EL对药物的活性有较大的影响.活性参数(pIC50)的值越大，药物作用在受体上的活性越好.从方程可以看出ΔE(H-L)越小，Q(C5)更正(即负电荷越少)药物的活性更强.因此可以看出ΔE(H-L)和Q(C5)可能是决定药物活性的主要因数.EL2对药物活性也有一定影响，但系数较小，影响也较小.3结论通过对灯盏花苷Ⅰ及其衍生物前线分子轨道的分析和构效关系的计算，计算结果定量的表明，当灯盏花苷Ⅰ及其衍生物作用于受体的时候，ΔE(H-L)和Q(C5)是决定药物活性的主要因数.文中所得到的表示pIC50与量子化学参数间关系的相关方程式，为类似衍生物的生物活性的预测提供了一个简单可行的
