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求SDS法提取斑马鱼DNA详细操作步骤及各步原理

器会汐er9    2009-12-16    核酸提取仪    浏览 568 次

我现在要用SDS法提斑马鱼鱼尾DNA,
按照我们老师给的讲义,需要用的试剂:细胞裂解液500ul(Tris-HCl 0.1M;EDTA 5mM;NaCl 0.2M;SDS 0.2%;蛋白酶k 100mg/ml)酚300ul,氯仿300ul(没有异丙醇)

求用这些试剂的情况下提取DNA的详细操作步骤及各部原理

精彩问答
汉共操耗侄障说 发布日期:2009-12-17
原理:SDS:使细胞裂解,使与DNA双链紧密相连的组蛋白分开和变性。EDTA:可以与镁离子螯合,从而有助于阻止核酸分子间的聚集,及核酸与蛋白质分子的聚集,与SDS一样,还可YZ核酸酶的活性。蛋白酶K:水解蛋白质,在SDS存在下活性增强,不受EDTA的YZ,在较高温度下仍有活性。苯酚/氯仿:去除变性的蛋白质及多糖、脂类等杂质。
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