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大肠杆菌培养及计数

刘博胤    2010-12-28    菌落计数器    浏览 475 次

在对培养的大肠杆菌进行活菌计数时,发现琼脂表面有乳白色微偏暗的直径约4~5mm的菌落,琼脂底部与培养皿接触的面上有浅色较浅的白色直径约3mm的菌落,而琼脂内的菌落却只有约1mm直径,请问琼脂内的菌落是大肠杆菌菌落吗?会不会是杂菌?如果是大肠杆菌,为什么... 在对培养的大肠杆菌进行活菌计数时,发现琼脂表面有乳白色微偏暗的直径约4~5mm的菌落,琼脂底部与培养皿接触的面上有浅色较浅的白色直径约3mm的菌落,而琼脂内的菌落却只有约1mm直径,请问琼脂内的菌落是大肠杆菌菌落吗?会不会是杂菌?如果是大肠杆菌,为什么一个平皿内的相同菌会形态不一样?

注:1.试验环境为无菌环境,操作均严格按照无菌操作进行。

2.培养的过程:冻干菌株——复苏——营养肉汤培养(37摄氏度摇床,约18小时)——营养肉汁琼脂培养基平皿画线培养(37摄氏度隔水恒温培养箱,约24小时)——(挑取单个菌落)营养肉汁琼脂斜面培养基培养(37摄氏度隔水恒温培养箱,约24小时)——活菌计数实验(培养:37摄氏度隔水恒温培养箱,约48小时)

精彩问答
陌傺烧赣牌用腹 发布日期:2010-12-29
从你的培养过程看;其中一个环节不知道你做了没有?培养基配制好后倒平板之前是否进行了灭菌?假如这步你没有做那么出现杂菌就是必然的,其琼脂内有杂菌也就是这个原因造成的。
琼脂底部与培养皿接触的面上有浅色较浅的白色直径约3mm的菌落。。这个问题是不是因为你的培养皿灭菌不彻底造成的。
你说的同一平板内同一菌种的形态却不一致,这个很可能是接种过后你的培养基被污染了,所以还是混了杂菌。还有一个原因就是你挑去的单菌落并不是纯的单菌落,它自身就含杂菌。
我的回答只能作为参考,希望对你有用。也希望你下次试验能成功。
全部评论
oedrr0 发布日期:2010-12-29
如果楼主在做活菌计数实验中,使用的是制作菌悬液,然后在制备好的平板上,做稀释涂布计数并严格按照无菌操作进行的话,上述楼主说提到的问题中,根本不会有菌落出现在平板底部和中部,如果是平板表面出现菌落大小不一的情况这个是很正常的,每一个菌落由单一细胞生成,但是起生长繁殖速度当然是有区别的了。
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