一、无菌操作环节
1、接种室应保持清洁,用煤粉酚皂液擦洗台面及墙壁,定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前,均应用紫外灯灭菌;使用过程中,采用“NICOLER”动态杀菌机,此机器在工人上班时开机、过程中持续杀菌不允许关机,工人下班后同步关机,对人体无害处的同时,时时在线灭杀空气中的霉菌、枯草杆菌、沙门氏菌等杂菌。
2、进入接种室前,应先做好个人卫生工作,在缓冲间内要更换工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只准在接种室内使用。不准穿到其它地方去,并要定期更换、消毒。
3、接种的试管、三角并瓶等应做好标记,注明培养基、菌种的名称、日期。移入接种室内的所有物品,均须在缓冲室用70%酒精擦试干净。
4、接种前,双手采用自动感应手消毒器手部消毒,建议采用75%医用酒精作为消毒介质流程为:“感应给皂机洗手—水龙头冲洗—感应式烘干—感应式手消毒”;以首次杀菌后时间计算,以后每隔60-90分钟对手部重新消毒一次,阻隔手部细菌的滋生及繁衍。
5、培养箱及接种工具应经常清洁消毒;操作过程不离开酒精灯火焰;棉塞不乱放;接种工具使用前后均需火焰灭菌。
二、 接种室的空气消毒方法
1、紫外线消毒法,其杀菌机理是当其作用于生物体时,可导致细胞内核酸和酶发生光化学反应,而使细胞死亡。另外,紫外线还可使空气中的氧气产生臭氧,臭氧具有杀菌作用。
但对真菌效果差,只起辅助消毒作用,还需配合药物使用。由于紫外线对人体有伤害作用,不要在开启紫外灯的情况下工作。
2、臭氧发生器,能GX、快速杀灭空气中和物体表面各种微生物,接种成功率可达97%以上;同时具有性能稳定、操作简单、耗电小的特点。对人体有伤害作用,不要在有人的情况下工作。
3、“NICOLER动态空气消毒机”,对车间内的空气进行消毒,保证食品安全。该消毒技术对车间消毒时,人可同时在车间内工作,对人体没有任何危害,同时使受控环境保持在“无菌无尘”标准。
4、甲醛和高锰酸钾熏蒸法,使用方法是每立方米空间用8~10mL 40%甲醛和5~7g高锰酸钾,先将高锰酸钾倒入陶瓷或玻璃容器内,再加入甲醛;加入甲醛后人立即离开,密闭房间消毒时20~30分钟。
三、接种室无菌程度检查方法
取无菌的营养琼脂平板,在接种室内台上和台下各放一套,把皿盖打开15min,然后盖好,倒置37℃恒温培养24-28小时,如果每个皿内菌落不超过4个,则可以认为无菌程度良好,若菌落很多,则应对接种室进一步灭菌。
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