病毒性肺炎(viral pneumonia)是由病毒侵犯肺实质细胞而造成的肺部炎症,常由上呼吸道病毒感染向下蔓延引起。随着呼吸道病毒检测技术的进步,病毒性肺炎的发病率和死亡率逐渐得到认识,研究人员发现流感病毒感染占病毒性肺炎患者的大多数。流感病毒是季节性流感和偶发性流感大流行的病原体。世卫组织估计,流行病每年导致约300-500万严重病例,约有29万-65万人死于呼吸道疾病。目前流行的季节性流感病毒包括A型的H1N1和H3N2以及B型。已有报道指出,平均每个季节由B型流感病毒引起的病例占流感相关死亡的29%,而在B型流感高发期,这一比例高达95%。
目前,ZL流感病毒感染的药物主要有两种,分别是M2离子通道阻滞剂(金刚烷胺、金刚乙胺)和神经氨酸酶YZ剂NAIs(奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦和拉尼米韦)。由于广泛耐药的出现和对B型流感病毒缺乏LX,M2离子通道阻滞剂不再推荐使用;因此,NAIs成为抗病毒的药物的主要类别。然而,耐NAIs突变体的出现仍会降低其LX。因此,对耐NAIs突变体的研究变得至关重要。
近日,ZG疾病预防控制ZX病毒病预防控制所国家流感ZX(世界卫生组织流感参比和研究合作ZX)等联合在《Virology》发表了名为Effectiveness of favipiravir (T-705) against wild-type and oseltamivir-resistant influenza B virus in mice的文章。Favipiravir法维吡韦也称为T-705,靶向流感病毒的RNA依赖的RNA聚合酶RdRp,可YZA,B和C型流感病毒,包括耐奥司他韦的菌株。该研究在其基础上检测了T-705对耐奥司他韦B型流感的功效。
在这项研究中,研究人员使用致死小鼠模型评估了T-705对野生型和耐奥司他韦的乙型流感病毒的影响。此外还评估了体内药物ZL后是否发生了诱导对T-705敏感性降低的突变。结果显示T-705以剂量依赖的方式保护小鼠免于致命感染。T-705还能显著降低病毒载量和YZ肺病理学。此外,表型分析显示T-705耐药病毒在T-705处理后没有出现,即T-705可以有效地保护小鼠免受野生型和对奥司他韦具有耐药性的B型流感病毒的致命感染。
文中使用Naica Crystal Digital PCR系统评估了T-705对野生型和耐奥司他韦的小鼠呼吸道病毒载量的影响,具体为测定了小鼠肺部、鼻甲骨、气管(对应下面两幅图的C/E/F)中流感病毒的非结构蛋白1 (NS1)基因拷贝数。
法国Stilla Technologies Naica数字PCR平台是实现DNA/RNA定量的技术工具,自动生成和组装单层平铺的微滴,进行单分子PCR扩增,通过高分辨率的三色荧光通道检测,自动QC质控,识别三色荧光中有效的阴阳性微滴,从而达到目的DNA/RNA的定量检测。同时提供原始数据、单微滴追溯等功能,确保数据真实可靠。
◐ 只需一步加样操作,无需标准品和标准曲线是真正的定量系统。通过对模板的有限稀释,耐受YZ剂能力强,更有利于临床、环境等复杂样本的检测。
◐ 有效微滴:25000~30000/样本,实现低浓度、低丰度的核酸样本进行准确定量。
◐ 封闭式芯片设计,样本间独立,避免了加样交叉污染风险,同时防止扩增后的气溶胶污染,保证结果安全可靠和实验环境安全。
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