当疫情再一次伺机而动时,要想快速的控制病毒的传播,做核酸检测就成了必经之路,同时也备受各界关注。但影响核酸检测结果的因素是多种多样的,包括样本采集部位、采集方式、储运过程、核酸提取操作等等。其中,样本的稳定性是一个关键环节。如何能使病毒快速失活,又能保护病毒核酸不被降解,维持检测稳定性的病毒样本保存液就成了重中之重。
第yi步:打破外壳,消灭“战斗力”
和其他RNA病毒一样,新冠病毒的结果简单来说,是由蛋白质外壳包裹着单链核酸——RNA构成的。我们可以简单地将病毒的RNA视为发号施令的“大脑”,蛋白质则是执行命令的“四肢”。新冠病毒感染人体并发生繁殖活动,引发病症,这个过程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白结构完成。
灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一种强有力的蛋白质变性剂,能迅速溶解蛋白质,导致病毒结构破碎。当带有新冠病毒的临床样本与保存液混合,样本中的病毒受裂解液作用,蛋白质外壳被迅速破坏,并且这种破坏是不可复原的。这时候,病毒就失去了作恶的“爪牙”,不再拥有对人的感染能力,从而保障了样本运输、处理过程中接触者的安全。
第二步:抑zhi酶活,押送“身份证”
外壳裂解后,新冠病毒的RNA游离在保存液当中。作为单链大分子,RNA的稳定性不像双链的DNA那样岿然不动,在自然环境中随处存在的RNA酶便是使RNA水解断裂的罪魁祸首。因此,通常认为失去外壳保护的病毒RNA是脆弱、不稳定的,需要低温储存才能保证它的完整性。
第三步:配合提取,确认“真凶”
病毒RNA妥善地储存在病毒样本保存液中,在进行检测前,还需要zui后一个步骤:将保存液中的RNA捕捉、浓缩,作为zui终样本加入实时荧光PCR体系中,上机进行检测。
德晟生产的病毒保存液除了灭活型病毒保存液外,还有非灭活型病毒保存液。它是同时保留病毒的蛋白质外壳和病毒核酸DNA或者是RNA,这样病毒在体外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,当然操作失误时也有一定的感染性风险。采样后长时间保存需要保持严格低温。不管是哪种病毒保存液,我们在使用时都需要按照要求严格操作、存放或运输。
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