ELISA实验之洗涤要点!
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术,应引起操作者的高度重视。
洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
1.浸泡式
①吸干或甩干孔内反应液;
②用洗涤液过洗一遍;
③浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1~2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
④吸干孔内液体,吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾上拍干;
⑤重复操作③和④,洗涤3~4次。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
2.流水冲洗式
流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。
天津市泰斯特仪器有限公司报价表(2020年)编号型号名称品牌市场价工作室尺寸(外形尺寸)宽×深×高(mm)电
天津艾维欧科技发展有限公司公司产品报价表(2020年)编号型号名称品牌市场价规格说明A0647158MS-1
本生详述YL器械经营管理平台(GSP平台)系统开
天津本生详述PCR管产品特征及用途 本生生物公司供应:elisa试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸
天津本生详述冻存管的使用方法和注意事项! 冻存管又称菌种保存管、磁珠保存管、磁珠冻存管。微生物实验室常用的菌种
天津本生详述PCR技术原理、实验步骤和应用 实验目的 1.掌握聚合酶链式反应的原理。 2.掌握移液枪和PCR仪的基
天津本生详述:如何正确使用移液器? DY步:移液器枪头的安装 移液器枪头的安装比较简单,常用的方法是旋转安装,把
核酸提取耗材深孔板,磁套的组成及特点? 深孔板规格: 96孔方孔尖底深孔板 96孔方孔尖底深孔板(灭菌) 96孔尖底
血清的主要成分和功能 牛血清在细胞培养中对细胞的生长增殖具有重要甚至是难以替代的作用,它含有丰富的细胞生长必须
本生详述详述:冻存管的分类和注意事项 冻存管别名冷冻管,一般用在实验室生物材料的低温保藏。 冻存管一般都是根据实