黄曲霉毒素(aflatoxins)是一种由黄曲霉和寄生曲霉等真菌经过聚酮途径产生的次生代谢产物,其结构通常包含一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮,天然产生的黄曲霉毒素根据其化学结构不同分为B₁、B₂、G₁ 、G₂四种。
食品遭受产毒真菌以及霉菌毒素污染的问题在世界范围内反复发生,被污染的农作物作为饲料资源被畜禽食用后, 携带的霉菌毒素又可在肉、蛋、奶等食品中蓄积,通过食物链传递, 危害人类健康。
逗点生物采用最新自主研发的Copure®228多功能净化柱,建立玉米粉中黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂检测的LC-MS/MS检测方法。该方法低、中、高三个水平的加标回收率均在90-100 %之间,RSD小于5 %,操作简便快捷,与国内外的竞品相比,具有回收率高和脱色净化效果好的优势,能够作为玉米粉中黄曲霉毒素检测的参考方法。
本方法适用于谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂的测定。
参照 《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》。
一、样品前处理
1.1 样品提取
(1)称取 5 g试样于50 mL离心管中,加入一定量同位素内标工作液振荡混合后静置30 min。
(2)加入20 mL乙腈-水溶液(84+16),涡旋混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min,在6000 r/min下离心10 min,取上清液备用。
1.2 样品净化
(1)向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。
(2)将Copure® 228多功能净化柱(货号:COAF228)橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端。
(3)将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样品瓶或EP管中。
(4)取5 mL净化提取液,氮气吹干,用1 mL初始流动相复溶,涡旋 30s 溶解残渣,过微孔滤膜,上机分析。
二、仪器条件
仪器设备:液相色谱-串联质谱联用仪 SCIEX Triple Quad™ 4500
色谱柱:Waters C18 2.1x100mm 1.7um
流动相:A:0.1%甲酸水 B:乙腈
流动相梯度:初始80%A,20%A(0 min~2 min),20%A(2 min~3 min),
80%A(3 min~3.1min),80%A(3.1min~5min)
流速:0.3 mL/min
柱温:室温
进样体积:10.0 μL
质谱条件:
检测方式:多离子反应检测(MRM);
表1 离子源控制条件
表2 离子选择参数
(注:*为定量离子)
三、实验结果
表3 玉米粉中黄曲霉毒素加标回收实验结果
图1 不同品牌多功能净化柱处理加标样品后的脱色效果图(①玉米粉加标样品-未净化处理 ②Copure®228-净化处理 ③ 国外A品牌-净化处理 ④ 国内B品牌-净化处理)
Copure®228脱色效果明显,其脱色能力与国外A品牌相当,并显著优于国内B品牌。
图2 使用Copure®228净化后的加标样品的EIC色谱图
四、订购信息
固相萃取柱(石墨化碳) PRS/PSA/SCX固相 GCB固相萃取柱 PRS固相萃取柱&n
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请问一下,在固相萃取实验中,SPE小柱是不是应该在所有的操作时都要保持湿润!还是只是洗脱的过程中,保持小柱