ELISA实验中加样应注意的问题
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ELISA实验以其灵敏度较高、特异性较好的特点在得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对实验的检测效果影响较大,如不注意,就有可能产生不准确的结果。今天我们就来介绍一下实验中加样可能会碰到的问题。
1、加样时间过长(特别是室内温度较高时)。遇到这种情况,如果标本为血清的话,可以将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;如果标本为血浆,就必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱的时候需要等待。如果标本较多时,可以分批操作,加样后一定要及时放入孵箱。
3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外,血清或血浆标本分离不好即进行加样。遇到这种情况,可以在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。如果采用AT或其他全自动加样,请选择FAME或其他处理仪器加酶试剂。
为了得到准确的结果,必须严格按照操作步骤进行加样,同时做好室内质控,要以严谨的工作态度检测每一份标本。
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