微分干涉显微镜下的屏幕瑕疵
微分干涉是显微成像技术中的扛鼎之作,它具有立体感强、成像清晰、细节丰富等特点。
1952年,Nomarski在相差显微镜原理的基础上发明了微分干涉显微镜,微分干涉英文简称DIC,是显微成像技术中的一种,分为观察水生物等透明样品用的透射DIC(生物DIC)和观察电路板等样品用的落射DIC(金相DIC)。在生物领域与相差显微镜相比,DIC的标本厚度可以略厚一点,而且立体感和细节更好。
金相显微镜MJ43
微分干涉显微镜相较于一般的显微镜有四个特殊的光学组件:起偏器、检偏器、一对带滑行器的DIC棱镜(金相DIC只需一个DIC棱镜),并且搭配专门的DIC物镜进行微分干涉观察。
DIC的原理为显微镜光源通过聚光系统前面的偏振器时光线发生线性偏振,再经过聚光镜中的DIC棱镜将一束光分解成偏振方向不同的两束光(x和y),这两束光相位一致,在穿过标本相邻区域后,由于标本的厚度和折射率不同,引起了两束光发生了光程差。在物镜后焦面处安装的DIC棱镜把两束光合并成一束。光束穿过检偏器,到达观察头成像。
x和y波的光程差决定着透光的多少。光程差为0时没有光穿过检偏器,光程差为波长一半时,穿过的光达到大值。于是在灰色背景上,标本结构呈现出暗亮差。光程差可改变影像的亮度,为了使影像反差达到大,可通过调节DIC滑行器来改变光程差,使得标本的细微结构呈现出正或负的投影形象,通常是一侧亮,而另一侧暗,这便造成了标本的人为三维立体感,类似大理石上的浮雕。
微分干涉显微镜通常用于观察透明的活体细胞或者经过透明化处理的样品,适用于研究活细胞中较大的细胞器,如果接上录像装置可以记录活细胞中的颗粒以及细胞器的运动。活细胞由于是透明的,不容易被发现,所以需要有些地方相互对比明显才可观察。微分干涉显微镜可使细胞的结构,特别是一些较大的细胞器,如核、线粒体等,立体感特别强,适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进行。
当我们用普通明场显微镜观察屏幕水晶膜样品损伤部位时,屏幕水晶膜样品损伤部位轮廓结构看不清晰,且样品的反差效果不明显,难以找到屏幕水晶膜的损伤部位,而我们利用明美微分干涉显微镜MJ43+MC50-S相机观察屏幕水晶膜损伤部位时,如图一、图二所示,我们可以很清晰的看到屏幕水晶膜的损伤部位的轮廓结构,且其结构边缘有很好的反差效果,使屏幕水晶膜样品损伤部位呈现出很好的立体浮雕的感觉,细节非常清晰明了。
明美是国家高新技术企业,创立至今已20年,专注于显微镜以及显微成像系统产品的研发、生产和销售,致力于显微成像领域的自动化、数字化、智能化;明美迄今已为10万+的用户提供过产品以及服务;明美曾屡获国家创新基金支持,被广东省科技厅认定为显微成像工程技术研究。
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微分干涉显微镜适于研究活细胞中较大的细胞器。将微分干涉显微镜接上录像装置,可以观察记录活细胞中的颗粒及细胞器
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