茜素红S染色液配制方法及染色原理
茜素红S是橙黄色的针状体。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素经发烟硫酸磺化,然后转变为钠盐制得。属一种蒽醌(Anthraquinone)类的衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与钙盐以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜红素染色,产生橘红色沉积。
原理:茜素红S(Alizarin Red
S)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。
用途:络合滴定指示剂和酸碱指示剂。茜素红能和许多金属离子生成稳定的红色络色物,在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;酸碱指示剂,一变色范围PH值3.7(黄)~5.2(紫),第二变色范围PH值10.1(紫)~12.0(浅黄);用于极谱法测定金属离子。
配制方法:将托盘天平上称取0.1g茜素磺酸钠定溶于100ml蒸馏水中转移入滴瓶中,贴标签备用。
或用茜素红粉加PBS溶解后,要注意调节PH值到7.2过滤就可以了。0.1%的茜素红Tris-HCL(PH8.3),
Tris的浓度做分子生物学一样的,用0.Imol/L的HCI或0 1%的NaOH调节。
保存:常温保存,有效期6个月。
注意事项:
1.试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面。
2.茜素红S染色时间根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下面观察,见钙盐成较深的橘红色即取出洗涤,如染色液时间过长,可能出现弥散现象。
3.为了您的健康和安全,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
茜素红S染色液
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